Анализ крови на гематологическом анализаторе с подсчетом тромбоцитов

Что показывает гематологический анализ крови

Проведение гематологического анализа крови дает возможность выявить присутствие многих заболеваний у пациентов. Он дает информацию о состоянии больного, поэтому широко распространен в медицине. Что это такое, в каких случаях назначается и какую информацию показывает, будет рассказано далее.

Получив результаты исследования, врач определяет присутствие патологии. Далее назначаются прочие диагностические мероприятия для подтверждения диагноза.

Что это за анализ

После его проведения врач получает информацию о ряде показателей:

Эритроциты.
Лейкоциты – белые элементы.
Количество гемоглобина (окрашивание крови).
Нейтрофилы, которые несут ответственность за уровень иммунной системы, устраняют проникновение инфекции.
СОЭ – скорость оседания эритроцитов (устаревшее название – РОЭ, т. е. реакция оседания эритроцитов).
Базофилы – элементы, вырабатывающие гистамин.
Эозинофилы. Несут ответственность за борьбу с паразитами, аллергенами.
Моноциты – важные элементы, отвечают за иммунитет.
Лимфоциты – клетки иммунной системы, устраняют вирусы и патогенные микроорганизмы.
Тромбоциты, которые участвуют в свертываемости крови.
Ретикулоциты – недозревшие эритроцитарные клетки.
Пропорция лейкоцитарных элементов в крови (определяется в процентах).

Проведение рассматриваемого анализа дает наиболее точные результаты по сравнению с другими методами, поэтому врачи считают необходимым в первую очередь назначать именно его.

Показания к проведению

Клинический анализ крови – наиболее важная процедура диагностики, проводится для точной оценки состояния здоровья, используется для выявления результативности назначенной терапии.

Показаниями для него служит ряд причин:

Протекание беременности с осложнениями.
Подозрение на малокровие.
Плановый осмотр пациента.
Воспалительные реакции.
Наличие инфекции.
Подготовительный этап перед операцией.
Реабилитационный период после хирургического вмешательства.
Подозрение на раковое новообразование.
Наличие паразитов (глистная инвазия).
Оценка состава крови, патологии крови.
Подозрение на болезни кроветворных органов.
Патологии сердца, сосудов.
Заболевания почек.
Болезни костной структуры.
Присутствие вирусов.

При возникновении подозрения на определенную болезнь врач назначает подобное исследование, по результатам нередко удается определить тип инфекционной реакции, состояние иммунитета, степень поражения патологией.

Какие заболевания и патологии позволяет диагностировать анализ

Отклонения от нормы различных показателей крови, выявленные после гематологического исследования, могут указывать на ряд проблем:

Недостаток железа, фолиевой кислоты в организме.
Авитаминоз.
Рак крови.
Малокровие.
Наличие раковой опухоли неизвестной локализации.
Сахарный диабет.
Сердечная, легочная недостаточность.
Ревматизм в обостренной форме.
Воспалительные реакции в организме.
Наличие гнойных очагов.
Закупорка вен почек.
Опухоль костного мозга.
Нарушение свертываемости крови.
Заболевания аутоиммунной системы.
Интоксикация организма.

Чтобы своевременно выявлять заболевания, необходимо раз в полгода проводить подобный анализ. Сделать это можно амбулаторно.

Что показывает анализ

После проведения исследования специалист способен определить наличие инфекционных, воспалительных, раковых, бактериальных патологий, протекающих в организме человека.

В ходе процедуры оценивается состав, структура, размер, весовая масса, уровень, процентное соотношение клеток крови.

Определяется количественное содержание гемоглобина, гематокрит и СОЭ. Проведение процедуры осуществляется на гематологическом анализаторе.

После получения результатов врач определяет эффективность назначенного лечения, при необходимости проводит корректировку.

Гематологическое исследование предоставляет самую точную и развернутую информацию. Для понимания клинической картины врачу необходимо уточнить уровень моноцитов и лимфоцитов.

Подготовка к исследованию

Для осуществления этого исследования используется контрольная кровь для анализатора, смесь кровяных клеток, консервантов и определенной жидкости, напоминающей по структуре плазму.

Забор крови для исследования осуществляется утром на пустой желудок, пить разрешается исключительно обычную негазированную воду. Материал берется из вены сгиба локтя, из пальца.

Перед сдачей необходима специальная подготовка, которая включает ряд простых правил:

На протяжении трех дней перед ней нельзя принимать лекарственные препараты, оказывающие влияние на свертываемость крови. О приеме других медикаментов нужно обязательно сообщить врачу непосредственно перед сдачей биоматериала, это даст возможность избежать неправильной трактовки результатов исследования.
Исключить прием спиртных напитков.
Не употреблять жирные, острые, жареные блюда.
Не пить крепкий чай и кофе за 8 часов до сдачи крови.
В день проведения анализа не курить, т. к. присутствие никотина в организме вызывает спазмы кровеносных сосудов.

Не рекомендуется проводить анализ для профилактического осмотра при заболеваниях вирусного характера, т. к. недуг искажает результаты и пациент отправляется на повторную сдачу крови.

Соблюдение простых мер даст возможность получить наиболее точные результаты.

Расшифровка результатов

Итоговый отчет с результатами исследования крови состоит из терминов и обозначений, которые не знакомы обычному человеку. Поэтому расшифровкой обязан заниматься квалифицированный врач, который обладает достаточным уровнем знаний.

При большом желании расшифровать отчет может и сам больной, для этого необходимо определить присутствие отклонений от нормы в соответствии с представленной ниже таблицей. Необходимо учитывать, что нормальные показатели у взрослого человека в зависимости от пола и у ребенка будут существенно отличаться.

источник

Гематологические исследования

WBC -Общее количество лейкоцитов (х10 9 /л)

RBC -Общее количество эритроцитов (10 12 /л)

MCV -Средний объем эритроцита (фл)

MCH -Среднее содержание гемоглобина в эритроците (пг)

MCHC -Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (%)

RDW-SD -Ширина распределения эритроцитов по объему (%)

RDW-CV -Ширина распределения эритроцитов по объему (фл)

PLT -Общее количество тромбоцитов (х109/л)

PDW -Ширина распределения тромбоцитов по объему (%)

MPV -Средний объем тромбоцитов (фл)

P-LCR -Количество гигантских ( ˃12 мкм) тромбоцитов (%)

IG % -Относительное количество незрелых гранулоцитов (%)

NEUT % -Относительное количество нейтрофилов (%)

LYMPH % -Относительное количество лимфоцитов (%)

MONO % -Относительное количество моноцитов (%)

E0% -Относительное количество эозинофилов (%)

BASO % -Относительное количество базофилов (%)

IG # -Абсолютное количество незрелых гранулоцитов (х10 9 /л)

NEUT# -Абсолютное количество нейтрофилов (х10 9 /л)

LYMPH # -Абсолютное количество лимфоцитов (х10 9 /л)

MONO# -Абсолютное количество моноцитов (х10 9 /л)

E0# -Абсолютное количество эозинофилов (х10 9 /л)

BASO# -Абсолютное количество базофилов (х10 9 /л)

Анализ выполняется на гематологических анализаторах фирмы SYSMEX.

2. Посчет тромбоцитов (на анализаторе и при микроскопии по Фонио)

Тромбоциты – безъядерные клетки крови дисковидной формы размером 2 – 4 микрометра. Тромбоциты выполняют ангиотрофическую и адгезивно-агрегационную функции и принимают участие в процессах свертывания и фибринолиза, обеспечивают ретракцию (уплотнение) кровяного сгустка. Они способны переносить на своей мембране циркулирующие иммунные комплексы, поддерживать спазм сосудов. При активации тромбоциты приобретают сферическую форму и образуют специальные выросты (псевдоподии), с помощью которых они соединяются между собой (агрегируют) и прилипают к поврежденной стенке сосуда (способность к адгезии). Активированные тромбоциты выбрасывают содержимое своих гранул в кровяное русло: факторы свертывания, пероксидазу, серотонин, ионы кальция, АДФ, фактор Виллебранда, тромбоцитарный фибриноген, фактор роста тромбоцитов, которые участвуют в процессе свертывания.

Анализ включает в себя определение следующих параметров:

PLT -Общее количество тромбоцитов (х10 9 /л)

PDW — Ширина распределения тромбоцитов по объему (%)

MPV — Средний объем тромбоцитов (фл)

P-LCR -Количество гигантских ( ˃12 мкм) тромбоцитов (%)

Тромбоциты по Фонио (х10 9 /л)

Анализ выполняется на гематологических анализаторах фирмы SYSMEX и с помощью микроскопа фирмы OLIMPUS.

Подсчет количества тромбоцитов осуществляется двумя методами:

— на гематологическом анализаторе окрашенных специальным красителем тромбоцитов (оптический метод)

— при световой микроскопии окрашенного мазка крови с использованием иммерсионного масла

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

ПРИЧИНЫ ТРОМБОЦИТОЗА (увеличение количества тромбоцитов)

Реактивный тромбоцитоз (носит временный характери вызван активацией кроветворения)

После спленэктомии ( 3 -6 месяцев)
После острой кровопотери (кровоизлияния, оперативные вмешательства)
После острого гемолиза
При злокачественных новобразованиях
Ревматоидный артрит
Язвенный колит
Остеомиелит
Туберкулез

Опухолевый тромбоцитоз (при миелопролиферативных заболеваниях)

Миелоидный лейкоз
Эритремия
Идиопатическая геморрагическая тромбоцитоемия

ПРИЧИНЫ ТРОМБОЦИТОПЕНИИ (уменьшение количества тромбоцитов)

Идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура
Гипо- и апластические анемии
Ауто- и имунные гемолитические анемии
Лейкозы
Метастазы рака в костный мозг
Дефицит витамина В₁₂ и фолиевой кислоты
Лекарства
Вирусные инфекции (в т.ч. системная красная волчанка)
Лимфопролиферативные заболевания
Протезирование клапанов сердца
Экстракорпральное кровообращение
Портальная гипертензия

Количество ретикулоцитов в периферической крови является показателем активности эритропоэза, то есть отражает эритропоэтическую активность костного мозга.

Анализ включает в себя определение 7 параметров:

RET% — Относительное количество ретикулоцитов (%₀)

RET# -Абсолютное количество ретикулоцитов (х10 9 /л)

IRF% — Относительное количество незрелых ретикулоцитов (%)

LFR% — Относительное количество зрелых ретикулоцитов (%)

MFR% — Относительное количество средних ретикулоцитов (%)

HFR% -Относительное количество больших ретикулоцитов (%)

RET – He -Содержание гемоглобина в ретикулоците (пг)

Анализ выполняется на гематологических анализаторах фирмы SYSMEX.

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

Анемии (критерий диагностики апластической анемии)
Диагностика эффективности эритропоэза
Оценка терапии неэффективного эритропоэза препаратами витамина В_12, ЭПО, препаратами железа
Лейкозы
Миелодиспластические синдромы
Оценка состояния после трансплантации костного мозга

ПРИЧИНЫ РЕТИКУЛОЦИТОЗА (повышение количества ретикулоцитов)

Острая геморрагическая анемия (после острой кровопотери на 3-4 сутки)
Гемолитическая анемия
Эффективная терапия следующими препаратами:

витамин В₁₂ (ретикулоцитарный криз на 5 – 8 день терапии)

препараты для лечения эритремии

препараты для лечения паркинсонизма

Гемолиз
Гемолитическая анемия
Талассемия
Малярия
Эритролейкозы
Метастазы в костный мозг
Успешная трансплантация костного мозга ( увеличение более чем на 20%)
Употребление допинга спортсменами (прием ЭПО)
Курение

ПРИЧИНЫ РЕТИКУЛОЦИТОПЕНИИ (снижение количества ретикулоциов)

Апластическая анемия
Анемии хронических заболеваний
Железодефицитная анемия
Сидеробластная анемия
В₁₂-дефицитная анемия
Миелодиспластические синдромы
Опухолевые процессы в костном мозге
Нарушения работы щитовидной железы (микседема)
Тяжелые болезни почек (снижение эритропоэза)
Тяжелый алкоголизм
Хронические инфекции
Прием оральных контацептивов, противосудорожных препапратов

Анализ включает в себя определение следующего параметра:

СОЭ -Скорость оседания эритроцитов (мм/ч).

Анализ выполняется по методу Панченкова как на анализаторе ROLLER,так и с помощью ручной методики.

5. Подсчет формулы крови (микроскопия)

Анализ включает в себя следующие параметры:

ПЯ % — Относительное количество палочкоядерных нейтрофилов (%)

СЯ % — Относительное количество сегментоядерных нейтрофилов (%)

ЛФ % -Относительное количество лимфоцитов (%)

МОН % -Относительное количество моноцитов (%)

ЭОЗ% -Относительное количество эозинофильных нейтрофилов (%)

БАЗ % -Относительное количество базофильных нейтрофилов (%)

Анализ выполняется путем подсчета групп лейкоцитов в окрашенном с помощью автоматической системы для окраски HEMATEK мазке крови при помощи световой микроскопии.

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

6. Определение свободного гемоглобина в плазме

У здоровых лиц в плазме содержится лишь незначительное (1—4 мг%) количество свободного гемоглобина. Это гемоглобин, выделившийся из закончивших свой жизненный цикл эритроцитов. Содержание свободного гемоглобина в плазме меняется в зависимости от интенсивности гемолиза и гемоглобинсвязывающей способности белков плазмы.

Анализ включает в себя определение следующего параметра:

Hb св. — Свободный гемоглобин (г/л)

Анализ выполняется на анализаторе HemoCue.

* Для расчета процента гемолиза, помимо определения свободного гемоглобина, нужен клинический анализ крови.

ПРИЧИНЫ ГЕМОГЛОБИНЕМИИ (повышенное содержание свободного гемоглобина в плазме крови)

Как правило, причиной повышения концентрации свободного гемоглобина являются состояния, при которых происходит повышенное разрушение эритроцитов:

Гемолитические анемии
Гемолитическая болезнь новорожденных
Гемоглобинопатии (серповидноклеточная анемия и ее варианты, талассемия, гемоглобиноз С),
Отравление гемолитическими ядами (чаще всего при укусах змей) с последующим развитием ДВС-синдрома
Гемолитические кризы в результате тяжелых посттрансфузионных реакций, при групповой или резус-несовместимости
Инфекционные заболевания (при малярии и как вторичный симптом при сепсисе)
Массивные ожоги (термические или химические)
Физиологическая гемоглобинемия (в результате воздействия на эритроидные клетки, расположенные в ткани легких или желудка при курении, гастрите, язвенной болезни).

Анализ включает в себя определение следующего параметра:

Шизоциты — (шт. на 10000 эритроцитов)

Подсчет шизоцитов (фрагментов эритроцитов) осуществляется при помощи световой микроскопии окрашенного мазка крови с использованием иммерсионного масла.

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

источник

Определение количества тромбоцитов в крови

Главная > Документ

Информация о документе
Дата добавления:
Размер:
Доступные форматы для скачивания:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА ТРОМБОЦИТОВ В КРОВИ

Микроскопический метод подсчета

Чаще всего используется метод подсчета тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазово-контрастной приставкой. Мало точен и не может быть рекомендован метод подсчета тромбоцитов в мазке крови.

В настоящее время все шире используются определение количества тромбоцитов и их распределение по величине (гистограмма) с помощью автоматических счетчиков крови. Эти аппараты точны и позволяют проводить экспресс-диагностику (определения выполняются за 1 мин).

Принцип. Производится подсчет тромбоцитов в камере Горяева с применением в качестве разводящей и гемолизирующей жидкости раствора оксалата аммония. При подсчете используют фазово-контрастную микроскопию.

Реактивы. 1% раствор оксалата аммония.

Ход определения. Исследование можно проводить как в крови, полученной из пальца, так и в стабилизированной цитратом венозной крови. В последнем случае полученный при подсчете результат умножают на коэффициент 1,1 (учитывают разведение венозной крови раствором цитрата натрия — 9:1).

Разведение крови. Самым удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках (не в меланжере). Для этого, в предварительно высушенную чистую силиконированную или пластиковую (полистирол) пробирку пипеткой отмеривают 1,98 мл 1% оксалата аммония и осторожно вносят в нее 0,02 мл крови. В течение 1-2 мин содержимое пробирки тщательно перемешивают без вспенивания. Заполняют две камеры Горяева и на 10-15 мин помещают их для оседания тромбоцитов во влажную камеру (чашку Петри со смоченной фильтровальной бумагой или марлей). В каждой камере подсчитывают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Фазово-контрастная микроскопия проводится при помощи обычного микроскопа, осветителя типа ОИ-19 (или аналогичного) и устройства для наблюдения методом фазового контраста КФ-1 или КФ-4.

Подготовка микроскопа. После установки на микроскопе фазовых объективов и фазового конденсора производят фокусировку объективов 40х на сетке камеры Горяева. Устанавливают освещение и центрируют изображение фазовой пластинки и кольцевой диафрагмы. Микроскопию проводят с зеленым светофильтром. При работе с фазово-контрастной установкой необходимо пользоваться камерами одного типа, так как фокусировка оптических систем зависит от толщины стекла камеры.

Расчет определения числа тромбоцитов в 1 мкл крови. Среднюю арифметическую величину из двух параллельных определений умножают на 1000 (площадь 25 больших квадратов — 1 мм 2 , высота камеры — 0,1 мм, разведение 1:100; следовательно, количество тромбоцитов должно быть умножено на1 х10х100 = 1000).

Нормальные пределы колебаний числа тромбоцитов в крови у человека составляют от 170 до 350 х 10 9 /л. Ошибка метода ± 6,5%.

Подсчет тромбоцитов в крови и определение их размера в мазке — важная часть диагностики тромбоцитопений, эссенциальной и полицитемической тромбоцитемии, ДВС-синдрома, тромботической тромбоцитопенической пурпуры и других микротромбоваскулитов, нарушений гемостаза при аутоимунных формах патологии (СКВ, антифосфолипидном синдроме и др.) и при гепатолиенальном синдроме. При наследственных тромбоцитопатиях наблюдаются формы с микроцитозом (синдром Вискотта-Олдрича) и преобладанием гигантских форм кровяных пластинок (аномалии Бернара-Сулье и Мей-Хегглина), а также формы без изменения размеров этих клеточных элементов.

Подсчет тромбоцитов на гематологическом анализаторе .

На сегодняшний день методом выбора при исследовании тромбоцитов является их определение на автоматическом анализаторе. Автоматические счетчики позволяют получать достаточно надежные результаты при определении количества тромбоцитов.

При подсчете тромбоцитов по Фонио коэффициент вариации находится в пределах 20%, в камере Горяева — составляет 7-10%, тогда как автоматический подсчет воспроизводится с точностью до 2-4%.

Современные анализаторы сигнализируют о выходе количества тромбоцитов за референтные пределы, наличии агрегатов тромбоцитов, макротромбоцитов или других элементов, сравнимых по объему с тромбоцитами (микроэритроциты), что существенно облегчает трактовку получаемых результатов.

В то же время следует иметь в виду, что в отличие от ручного подсчета тромбоцитов, где проводится предварительный лизис эритроцитов, автоматические счетчики крови анализируют тромбоциты и эритроциты в одной камере без предварительной обработки. Тромбоциты распознаются по размерам в диапазоне 2-20 фл. Это создает проблему дифференцирования больших форм тромбоцитов (макротромбоцитов) и сравнимых с ними по объему эритроцитов (микроцитов), их фрагментов (шизоцитов), а также отшнуровавшихся фрагментов цитоплазмы лейкоцитов (клеточный дебрис).

Ложное занижение числа тромбоцитов может быть при их агрегации, агглютинации под действием тромбоцитарных агглютининов и при прилипании тромбоцитов к лейкоцитам (тромбоцитарный «сателлитизм»). При подсчете на гематологических анализаторах в качестве антикоагулянта используется ЭДТА. При наличии аутоантител к тромбоцитам калиевая соль ЭДТА инициирует агрегацию тромбоцитов, что проявляется псевдотромбоцитопенией.

Нормальные величины. Количество тромбоцитов у здоровых людей составляет 170 — 350 х 10 9 /л.

Снижение количества PLT в крови — тромбоцитопения — может развиваться в результате снижения продукции PLT:

наследственные: синдром Франкони (Фанкони), врожденная тромбоцитопения, краснуха новорожденных;

приобретенные: лейкозы, миелодиспластические синдромы, миелофиброз, метастазы новообразований в костный мозг; дефицит витамина В12 и фолиевои кислоты (мегалобластные анемии), ночная пароксизмальная гемоглобинурия, вирусные инфекции, интоксикации, наследственные аномалии, ионизирующее облучение, прием миелодепрессивных препаратов, циклическая тромбоцитопения, почечная недостаточность. в результате повышения деструкции PUT: инфекции (значительное, иногда катастрофическое снижение PLT, наблюдается при Конго-Крымской геморрагической лихорадке), эклампсия беременных, гемолитико-уремический синдром (ГУС), ВИЧ-инфекция, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, системная красная волчанка, хронический лимфолейкоз, хронический активный гепатит, посттрансфузионная тромбоцитопения; гемодиализ, кровотечения, разрушение в селезенке (гиперспленизм при болезнях накопления, лимфомах, волосатоклеточном лейкозе, миелопролиферативных заболеваниях, портальной гипертензии);

в результате потребления PLT: синдром ДВС.

Клинико-диагностическое значение тромбоцитопений (по С.А. Луговской и соавт., 2002)

Клинические ситуациии патологические состояния

Недостаточность гемопоэза -нарушение образования тромбоцитов

Гипо-и апластические состояния, лейкозы, метастазы рака в костный мозг, ионизирующее облучение, химиотерапия, дефицит витамина В12 или фолиевои кислоты, вирусные инфекции, сепсис, милиарный туберкулез и др.

Повышенное потребление тромбоцитов

Кровопотеря, ДВС, гигантская гемангиома, тромбоз, геморрагическая тромбоцитемия.

Повышенная деструкция тромбоцитов (внутриклеточный, внутрисосудистый гемолиз)

Ауто- и иммунные гемолитические анемии, изоиммунные, гетероиммунные (гаптеновые), лекарственные, вирусные, системная красная волчанка, лимфопролиферативные заболевания, поеттрансфузионные реакции и др.

Механические повреждения тромбоцитов

Протезирование клапанов сердца, экстракорпоральное кровообращение.

Интоксикация: экзогенная, эндогенная

Химические вещества, лекарственные препараты, алкоголь, уремия, тяжелые заболевания печени.

Повышенная секвестрация в селезенке (гиперспленизм)

Спленомегалия при циррозе печени, портальной гипертензии, гистиоцитозах, болезнях накопления, болезни Гоше, синдроме Фелти, туберкулезе селезенки, миелопролиферативных заболеваниях, талассемии.

(по С.А. Луговской и соавт., 2002)

Характеристика антитромбоцитарных антител

Идиопатическая (аутоиммунная) тромбоцитарная пурпура

Аутоантитела против неизмененных антигенов тромбоцитов больного

Гаптеновая (гетероимунная) тромбоцитопения

Гаптеновые аутоантитела против измененных или чужеродных антигенов на поверхности тромбоцитов

Антитела против комплекса лекарства (хинин, гепарин) с тромбоцитарным антигеном

Тромбоцитопения, ассоциированная с вирусной инфекцией

Антитела против вирусных антигенов, фиксированных на поверхности тромбоцитов, или против измененных тромбоцитарных антигенов

Аллоантитела против аллоантигенов тромбоцитов плода или переливаемых тромбоцитов

Неонатальная аллоиммунная тромбоцитопеническая пурпура

Аллоантитела матери, проникшие в организм плода. Направлены против аллоантигенов тромбоцитов плода и отца, отсутствующих на тромбоцитах матери

Повышение количества PLT в крови — тромбоцитоз — характерно для миелопролиферативных заболеваний. Тромбоцитоз наблюдается также при злокачественных новообразованиях, после операций, при воспалительных заболеваниях (острый ревматизм, ревматоидный артрит, туберкулез, остеомиелит), после спленэктомии, циррозе печени, кровотечениях, в период выздоровления при мегалобластных анемиях, лечении кортикостероидами, остром гемолизе, физических перенапряжениях.

Спленэктомия, острая кровопотеря, острый гемолиз, состояние после операции, злокачественные новообразования, ревматоидный артрит, туберкулез, язвенный колит, остеомиелит

Миелопролиферативные заболевания (хронический миелолейкоз, идиопатический миелофиброз, эритремия, хронический мегакариоцитарный лейкоз), острый мегакариобластный лейкоз, идиопатическая геморрагическая тромбоцитемия

Средний объем тромбоцита (МРV)

У здоровых людей MPV равен 6-12 фл и находится в обратной зависимости от числа тромбоцитов. MPV увеличивается с возрастом. У мужчин MPV несколько выше, чем у женщин.

Использование ЭДТА в качестве антикоагулянта вызывает изменение формы тромбоцитов от диска к сфере, что приводит к увеличению MPV на 10-12% в течение 2 часов, а затем показатель существенно не меняется. Под действием цитрата натрия MPV может уменьшаться или увеличиваться, а при высокой концентрации (1:4) — не изменяется со временем. Кроме типа применяемого антикоагулянта и времени от момента взятия пробы до исследования, на MPV оказывает влияние температура окружающей среды. Преходящее увеличение MPV отмечается у рабочих, контактирующих с асфальтовыми испарениями, органическими растворителями. MPV — важный диагностический показатель функции тромбоцитов.

PDW — показатель, являющийся мерой гетерогенности размеров (анизоцитоза) тромбоцитов. Величина PDW в среднем составляет 10-15%.

Как артефакт, ложно завышенное увеличение PDW может быть связано с присутствием микроцитов, шизоцитов, микроагрегатов тромбоцитов, фрагментов цитоплазмы лейкоцитов.

Этот показатель находится в обратной зависимости от числа тромбоцитов и их периода жизни. В каждом конкретном случае важна не только величина PDW, но и ее динамика во времени, а также связь с другими тромбоцитарными показателями. Так, увеличение PDW с одновременным снижением MPV свидетельствует о преобладании микротромбоцитов среди общей популяции тромбоцитов (указывает на угнетение тромбоцитопоэза), а сочетание повышенного PDW с увеличением MPV отражает нарастание числа макротромбоцитов (усиление продукции тромбоцитов). Одновременное присутствие фракций макротромбоцитов и микротромбоцитов ведет к увеличению PDW, но MPV может оставаться в пределах нормы. В современных гематологических анализаторах отдельными показателями указывается процентное содержание микротромбоцитов (MicroPLT) и макротромбоцитов (MacroPLT).

PDW может применяться для дифференциальной диагностики. Так, увеличение PDW свыше 15% было обнаружено у 50% больных эссенциальной тромбоцитемией, у 21% пациентов с реактивным тромбоцитозом и лишь у 14% здоровых людей.

РСТ — показатель, характеризующий процент тромбоцитарной массы в объеме крови: вычисляется суммированием прямо измеренных объемов тромбоцитов или произведением среднего объема тромбоцитов на их число.

У здорового человека показатель стремится остаться стабильным: при уменьшении числа тромбоцитов усиливается тромбопоэз, в циркулирующую кровь выбрасывается большее число молодых макротромбоцитов, что ведет к увеличению MPV. При увеличении количества циркулирующих тромбоцитов снижается продукция их в костном мозге, тем самым уменьшается процент макротромбоцитов и MPV уменьшается. Однако при нарушении этого равновесия происходит или уменьшение РСТ, что, в конечном счете, приводит к патологии первичного гемостаза и риску возникновения кровотечений, или повышение РСТ, увеличивающее активность тромбоцитов и их способность к агрегации. Это повышает риск тромбозов.

Нормальные значения РСТ варьируют в пределах 0,15-0,35%. Было обнаружено, что снижение РСТ менее 0,1% обусловило возникновение послеоперационных кровотечений у пациентов с развившейся тромбоцитопенией. Также было отмечено, что этот показатель оказался более чувствительным для оценки риска возникновения кровотечения, чем число тромбоцитов.

Если скрининговые методы указывают на нарушение функции тромбоцитов, необходимо выполнить специальные тесты с учетом диеты и лекарственных препаратов, принимаемых пациентом (отмена за 7-10 суток перед исследованием глюкокортикостероидов, аспирина и других нестероидных противовоспалительных средств, адреноблокаторов, блокаторов кальциевых каналов, антиагрегантов: пентоксифиллина, папаверина, теофиллина, дипиридамола, тиклопидина, антибиотиков — пенициллина, карбенициллина).

Методы определения длительности кровотечения

Длительность кровотечения является скрининговым тестом для выявления нарушений первичного гемостаза. Метод основан на определении времени кровотечения из нанесенной на поверхности кожных покровов небольшой ранки стандартного размера. Это время зависит от способности сосудисто-тромбоцитарных гемостатических механизмов останавливать кровотечение из поврежденных мелких сосудов и капиллляров и поэтому его продолжительность может характеризовать состояние первичного гемостаза. Оно может быть нарушено вследствие дефектов сосудистого звена, неполноценности функциональных свойств кровяных пластинок или дефицита/дефекта плазменных кофакторов тромбоцитарных реакций (фибриногена, фактора Виллебранда), выраженной тромбоцитопении. При снижении числа тромбоцитов менее 100×109/л имеется прямая связь между степенью тромбоцитопении и удлинением времени кровотечения. Длительность кровотечения коррелирует также с геморрагическими тенденциями при тромбоцитопатиях и болезни Виллебранда. Увеличение времени кровотечения наблюдается и при тяжелой анемии (Ht Duke , при выполнении которого колотую ранку глубиной 3,5 мм наносят скарификатором в нижней части мочки уха; выступающие капли крови осторожно, не прикасаясь к раневой поверхности, снимают фильтровальной бумагой через 15-30 с. Регистрируют время от момента нанесения укола до прекращения кровотечения, которое в норме не превышает 4 мин. Тест малочувствителен и не позволяет выявить нарушения при тромбоцитопатиях легкой и средней тяжести.

Наиболее распространенными за рубежом методами определения длительности кровотечения второй группы являются различные модификации метода Ivy, который предложил проводить исследование на верхней конечности в условиях веностаза, затрудняющего сосудистые реакции.

Определение длительно сти кровотечения по методу Айви

Оценивают длительность кровотечения после разреза кожи предплечья скарификатором с глубиной разреза 3 мм. Стандартизация метода достигается равной глубиной кожного разреза и созданием венозного стаза путем повышения венозного давления до 40 мм рт. ст. при помощи сфигмома-нометра, что предупреждает эффект преждевременного склеивания краев раны.

Скарификатор, способный осуществить разрез кожи глубиной 2-3 мм.

Сфигмоманометр накладывают на плечо, нагнетают в нем давление, равное 40 мм рт. ст., и поддерживают такое давление в течение всего исследования.

Ладонную поверхность предплечья обрабатывают раствором этанола.

Натягивают кожу предплечья в поперечном (по отношению к костям предплечья) направлении.

Скарификатором наносят три разреза кожи по 5—10 мм (направление разреза должно быть перпендикулярно натяжению кожи предплечья, т. е. параллельно костям предплечья) глубиной 3 мм и включают секундомер.

Капли крови осторожно удаляют фильтровальной бумагой путем ее смачивания через каждые 15-30 с.

Регистрируют время остановки кровотечения из каждой ранки.

Снижают давление в манжете сфигмоманометра.

Вычисляют средний результат длительности кровотечения для каждого из трех разрезов.

Оценка результатов исследования

Существует несколько схожих методов для оценки длительности кровотечения [WW Duke, 1910; C.F. Borchgrevink, B.A. Waaler, 1958], однако метод Айви отличается от аналогичных неплохой воспроизводимостью и малой травматичностью. В оригинальном исполнении нормальное время кровотечения не превышает 8 мин, однако указанный норматив условен, поскольку результаты определения длительности кровотечения этим методом значимо варьируют в зависимости от варианта скарификатора и опыта исследователя, поэтому необходимо уточнить нормативы для каждой лаборатории. При тромбоцитопениях, тромбоцитопатиях и болезни Виллебранда длительность кровотечения часто удлинена, а при изолированных дефектах коагуляцион-ного гемостаза (гемофилии и др.) длительность кровотечения не отличается от нормы.

Нестандартный скарификатор, неглубокий (менее 3 мм) разрез кожи, недостаточная квалификация лаборанта.

Исследование агрегационной функции тромбоцитов

Тромбоциты способны агрегировать под воздействием различных субстанций, называемых индукторами (стимуляторами) агрегации (АДФ, адреналин, арахидоновая кислота, тромбин, кальциевый ионофор А23187, коллаген, фибрин-мономер, бычий коагуляционный фактор VIII, ристоцетин и др.). Изучение агрегационной функции тромбоцитов осуществляют при помощи специального прибора — агрегометра. В основе записи агре-гатограммы этим прибором — принцип Борна, который предполагает графическую регистрацию выраженности уменьшения оптической плотности богатой тромбоцитами плазмы в процессе агрегации тромбоцитов. В случае нарушения агрегационной функции тромбоцитов происходит незначительное изменение оптической плотности, что и регистрирует этот прибор.

Забор крови и подготовка плазмы для исследования

После пункции локтевой вены самотеком кровью наполняют пластиковую или силиконированную пробирку, в которую предварительно добавлен раствор цитрата натрия (соотношение объемов крови и цитрата натрия равно 9:1). Затем пробирку тщательно и аккуратно (без встряхивания) перемешивают в течение 2-3 минут.

Материалом для исследования является бедная тромбоцитами плазма.

БТП получают в два этапа. На первом этапе получают богатую тромбоцитами плазму, для чего цитратную кровь центрифугируют в течение 7 минут при 240 g. На втором этапе богатую тромбоцитами плазму переносят в другую пробирку и повторно центрифугируют в течение 15 минут при 1200-1400 g.

0,11 М раствор цитрата натрия (Na3C6H607).

Агрегометр с компьютером и принтером.

Стимуляторы агрегации (АДФ, адреналин, коллаген и др.). В табл. 12 представлены оптимальные конечные концентрации наиболее распространенных стимуляторов агрегации тромбоцитов.

Таблица. Оптимальные конечные концентрации стимуляторов агрегации тромбоцитов

источник