Анализ крови на мутацию гена сур 21

Генетическая диагностика адреногенитального синдрома, исследование мутаций гена CYP21A2

Выявление делеции гена CYP21A2

Выявлении конверсии гена CYP21A2

Выявление мутации -113 bp гена CYP21A2

Выявление мутации 12G в гене CYP21A2

Выявление мутации P30L в гене CYP21A2

Выявление делеции 8bp в гене CYP21A2

Выявление мутации F306+T в гене CYP21A

Выявление мутации I172N в гене CYP21A2

Выявление мутации I236N в гене CYP21A2

Выявление мутации M239K в гене CYP21A2

Выявление мутации P453S в гене CYP21A2

Выявление мутации Q318X в гене CYP21A2

Выявление мутации R356W в гене CYP21A2

Выявление мутации V237E в гене CYP21A2

Выявление мутации V281L в гене CYP21A2

Адреногенитальный синдром, врождённая гиперплазия надпочечников.

Congenital adrenal hyperplasia.

Локализация гена на хромосоме

Полимеразная цепная реакция.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Врождённая гиперплазия надпочечников (ВГН) представляет собой группу наследственных аутосомно-рецессивных заболеваний, которые характеризуются нарушением работы ферментов, ответственных за метаболизм кортизола и/или альдостерона. Примерно в 90% случаев ВГН вызывается генетическими аберрациями в гене CYP21A2, что приводит к снижению активности фермента гидроксилазы-21. Изменение активности данного фермента приводит к нарушению синтеза 11-дезоксикортизола из 17-гидроксипрогестерона, что, в свою очередь, ведет к дефициту кортизола и альдостерона, повышению уровня АКТГ, гиперплазии коры надпочечников и усилению секреции надпочечниковых андрогенов. Так, при гомозиготных или компаундных гетерозиготных делециях и конверсиях гена CYP21A2, а также при небольшой делеции 8 нуклеотидов и точечных мутациях 113 bp, I236N, V237E, M239K, I172N, F306+T, I2G,Q318X активность фермента гидроксилазы-21 значительно снижается. При данных типах аберраций развивается простая вирилизирующая или сольтеряющая форма ВГН. Однако было показано, что в гетерозиготном состоянии данные аберрации также могут приводить к развитию неклассической формы ВГН.

После рождения у девочек и мальчиков с простой вирилизирующей формой ВГН наблюдаются симптомы гиперандрогении: увеличение клитора и полового члена, ускоренный рост, угревая сыпь, раннее оволосение лобка. При сольтеряющей форме ВГН наблюдаются гипотензия, гипонатриемия, гипогликемия, гиперкалиемия, рвота, гиперпигментация кожных покровов, нарушение развития, а также в некоторых случаях острый надпочечниковый криз. Исследования рекомендуется проводить при подозрении на вирилизирующую или сольтеряющую форму, а также в комплексе с мутациями, характерными для неклассической формы.

Неклассическая форма врождённой гиперплазии надпочечников (НВГН), вызванная мутациями гена CYP21A2, представляет собой частое наследственное аутосомно-рецессивное заболевание с распространенностью, достигающей 1:200. При данном заболевании наблюдается увеличенная продукция андрогеновых гормонов, что объясняет некоторые клинические проявления заболевания. При НВГН уровень активности фермента гидроксилазы-21 составляет 20-50%, что объясняет отсутствие тяжелых эндокринологических нарушений у пациентов данной группы, которые характерны для классических форм ВГН. Мутации P453S, R356W, V281L и P30L чаще всего вызывают НВГН.

Для пациентов с НВГН характерна значительная вариабельность клинических проявлений: в молодом возрасте может наблюдаться преждевременное половое созревание, акне, усиленный рост; во взрослом возрасте проявления могут включать в себя у мужчин олигоспермию и бесплодие, у женщин – аменорею, олигоменорею, ановуляцию, синдром поликистозных яичников, гирсутизм, акне и бесплодие. Рекомендуется проводить исследование при бесплодии у мужчин и женщин, акне, наурешении овуляционного цикла и менструаций.

Для чего используется исследование?

Для диагностики ВГН и дифференциальной диагностики синдрома поликистозных яичников, гиперандрогенемии и бесплодия.

Когда назначается исследование?

При подозрении на ВГН.
При дифференциальной диагностике у женщин:
- синдрома поликистозных яичников;
- гиперандрогении;
- бесплодия;
- гирсутизма;
- акне и нарушения цикла.

Обнаружение гомозиготной мутации или компаундных гетерозигот подтверждает диагноз «ВГН». Было показано, что гетерозиготное носительство ряда мутаций может вызывать симптоматику неклассической формы ВГН.

Что может влиять на результат?

Хотя генетический тест является точным методом лабораторной диагностики, время клинических проявлений заболевания (пенетрантность болезни) зависят от внешней среды, индивидуальных генетических факторов. Наличие дупликации гена CYP21A2 может влиять на выявление других точечных аберраций.

Для получения заключения по результату обследования необходимо проконсультироваться у клинического генетика.

Кто назначает исследование?

Гинеколог, эндокринолог, репродуктолог, уролог.

источник

Анализ на адреногенитальный синдром (CYP21OHB)

Адреногенитальный синдром (CYP21OHB)

Адреногенитальный синдром — наследственная аутосомно-рецессивная патология, при которой повышается продукция гормонов коры надпочечников. Эта патология проявляется прогрессирующей маскулинизацией и мужчин, и женщин — у пациентов происходит нарушение синтеза фермента 21-гидроксилазы (белкового продукта гена), вследствие чего резко увеличивается выработка андрогена, начинающаяся еще во внутриутробном периоде.

В настоящее время известно существование двух основных классических форм адреногенитального синдрома:

Вирильной — проявлении классических признаков при нормальном гормональном фоне кортизола и альдостерона. У новорожденных девочек при нормальном развитии женских половых органов вирилизация (тенденция к проявлению мужских половых признаков) проявляется умеренным увеличением клитора либо формированием мужских половых органов. У мальчиков патология проявляется ранним половым созреванием и низким ростом.
Сольтеряющей — нарушении солевого обмена помимо обычных проявлений, вызывающего дефицит кортизола и альдостерона. Симптомы патологии проявляются в первые дни жизни младенца: не переваривание пищи, потеря веса, обезвоживание, снижение концентрации в крови натрия и повышение калия.

Неклассической формой синдрома считают позднюю форму заболевания, которая характерна появлением первых признаков в период полового созревания. У мальчиков ускоряется костный возраст и рано проявляется половое оволосение. У девочек признаки включают увеличение клитора, нарушение менструальной функции, при этом присуще телосложение по мужскому типу.

Основное предназначение данного исследования — выявление наиболее частых аминокислотных замен структуры 21-гидроксилазы, происходящих в результате мутаций гена CYP21OHB:

CYP 21OHA/B P30L C >T;
V282L G>T;
Q319X C>T;
IVS2-13 A/C>G;
707-714 8bp del wt>del;
I173N T>A хромосома 6p21.33.

Показания для проведения анализа

Суть исследования

Биоматериалом для проведения анализа служит цельная кровь из вены, отбор проводят в утреннее время, специальной подготовки к нему не требуется.

В проведении исследования используют методику полимеразной цепной реакции (ПЦР), которая позволит провести идентификацию наличия в биоматериале искомого участка генетического материала:

хромосомных перестроек гена CYP21OHB (в 3-ей последовательности ДНК);
мутации сплайсинг-сайта (удаления) во 2-ом интроне этого же гена.

Интерпретация полученных результатов

Нормальным показателем тестирования считается отсутствие полиморфизма гена CYP21OHB (CYP21A2).

Оценивание результатов проводится специалистом — генетиком, возможно несколько версий заключения:

дефект сплайсинг-сайта во 2-ом интроне не обнаружен;
обнаружена гетерозиготная форма полиморфизма сплайсинга во 2-м интроне;
выявлено изменение сплайсинга в гомозиготном состоянии.

В результатах указывается соотношение делеции (замены) гена и псевдо-гена в 3-м экзоне.

Своевременная диагностика и корректное лечение помогут справиться с тяжелыми последствиями адреногенитального синдрома, которые могут закончиться гибелью младенца от сольтеряющих кризов, ошибкой в выборе половой принадлежности, нарушением роста и полового созревания, а так же бесплодием.

источник

Адреногенитальный синдром (врождённая гиперплазия коры надпочечников) — наиболее частые мутации в гене CYP21OHB (делеция в 3-м экзоне и IVS2-13A/C-G) (ADRENAL HYPERPLASIA, CONGENITAL — STERO >

Данный анализ предназначен для выявления наиболее частых мутаций гена CYP21OHB, ответственного за развитие неклассической формы адреногенитального синдрома (АГС). Исследование мутаций чаще имеет диагностическое значение у больных с поздними клиническим проявлением заболевания.

ГЕН ВХОДИТ В СОСТАВ ИССЛЕДОВАНИЙ:

Ген CYP21OHB кодирует выработку фермента 21-гидроксилазы, участвующего в переводе 17-гидроксипрогестерона в 11-гидроксидезоксикортизол. Мутации в гене CYP21OHB ведут к блоку синтеза указанного фермента, что в свою очередь, исходя из схемы синтеза стероидных гормонов, ведёт к накоплению предшественников кортизола: 17-гидроксипрогестерона, прегненолона, 17-гидроксипрегненолона и прогестерона, которые в сетчатом слое коры надпочечников конвертируются в надпочечниковые андрогены. Пониженная концентрация кортизола в крови стимулирует синтез кортиколиберина гипоталамусом и ведёт к повышенной секреции АКТГ и, как следствие, к гиперплазии коры надпочечников.

Клинически классические формы АГС характеризуются усиливающейся вирилизацией, ускоренным соматическим развитием, повышенным выделением гормонов коры надпочечников. Наиболее часто встречается тип гиперплазии надпочечников, вызванный дефицитом 21-гидроксилазы (95% всех случаев). Поэтому важным лабораторным маркёром считается значительный избыток 17-гидроксипрогестерона в сыворотке, наблюдаемый уже в первые годы жизни.

Вирильная форма заболевания (1/3 классических случаев АГС) наблюдается при неполном дефиците 21-гидроксилазы. Биосинтез андрогенов не нарушен, что приводит к их избыточной продукции еще при внутриутробном развитии. У новорождённых девочек отмечается разная степень маскулинизации от умеренной гипертрофии клитора до полного срастания губно-мошоночных складок с формированием предстательной железы, мошонки, полового члена с отверстием мочеиспускательного канала. Внутренние половые органы сформированы правильно, кариотип 46,ХХ. Отмечается гиперпигментация околососковой и генитальной областей. У мальчиков основными клиническими симптомами являются раннее половое развитие и низкий рост, связанный с преждевременным закрытием зон роста эпифизов. При этом электролитный баланс, уровень кортизола и альдостерона в норме.

Сольтеряющая форма наблюдается при полном дефиците фермента (2/3 классических случаев заболевания). На первый план при этой форме выступают такие симптомы как рвота, тахикардия, сонливость, признаки дегидратации, гипонатриемия, гиперкалиемия.

При поздней (неклассической) форме, которая может проявлятся либо по типу вирильной, либо сольтеряющей формы АГС отсутствуют симптомы вирилизации у девочек при рождении. Первые признаки появляются в подростковом возрасте. Для девочек характерно умеренное увеличение клитора, ускорение костного возраста, нарушение менструальной функции, маскулинное телосложение. Для девочек очень важна своевременная дифференциальная диагностика этой формы АГС от синдрома поликистозных яичников, имеющих сходную клиническую картину с АГС. У мальчиков признаки менее заметны, единственными симптомами могут быть ускорение костного возраста и преждевременное половое оволосение. Рост у взрослых ниже среднего, фертильность снижена. У таких пациентов наряду с клиническими проявлениями наблюдается умеренное повышение в сыворотке крови уровня 17-гидроксипрогестерона.

При всех формах заболевания отмечается повышение в моче уровня 17-кетостероидов и прегнантриола. Тип наследования заболевания аутосомно-рецессивный.

В ходе генетического тестирования производится поиск делеции гена CYP21OHB (в 3-м экзоне), вызывающей 30% случаев сольтеряющей формы заболевания, и мутации сайта сплайсинга во втором интроне того же гена (IVS2-13A/C-G или 656A/C-G), вызывающей 35% случаев сольтеряющей формы АГС. Генетическое тестирование принимает особое значение для выявления неклассических форм АГС.

Материал для исследования: цельная кровь (2 — 3 мл), взятая с ЭДТА.
Метод определения: ПЦР.

Смотрите также:

Клинические и/или лабораторные признаки адреногенительного синдрома и сходных нозологических форм (для дифференциальной диагностики).

Варианты заключений:

— мутация сайта сплайсинга во 2 интроне не обнаружена;
— обнаружена мутация сайта сплайсинга во 2 интроне в гетерозиготной форме;
— обнаружена мутация сайта сплайсинга во 2 интроне в гомозиготной форме.
Также указывается соотношение копий гена (b) и псевдогена (а) в 3-м экзоне. Частота заболевания: 1:1 000 000 — неклассическая форма; 1:18 000 – классическая форма.

источник

Анализ полиморфизмов гена стероид-21-гидролаза (CYP21,9 точек) (адреногенитальный синдром)

Описание

Анализ полиморфизмов гена стероид-21-гидролаза (CYP21,10 точек) (адреногенитальный синдром) — генетическое исследование основных мутаций в генах стероид-21-гидролаза. Результаты анализа позволяют выявить причину развития патологии и назначить своевременное адекватное лечение.

Адреногенитальный синдром — спектр заболеваний, обусловленных дефицитом ферментов, которые участвуют в синтезе стероидных гормонов в надпочечниках. Патология характеризуется повышенным уровнем андрогенов. Наиболее частая причина это дефицит 21-гидроксилазы. Заболевание передается по наследству, по аутосомно-рецессивному типу.

Ген фермента 21-гидроксилазы расположен на коротком плече хромосомы 6. Существует два гена — активный ген CYP21-B, кодирующий 21-гидроксилазу, и неактивный псевдоген CYP21-A. Эти гены в значительной мере гомологичны.

Различают следующие формы заболевания: вирильная, сольтеряющая, гипертензивная, вирильная с периодическими лихорадками. Симптомы заболевания могут развиться в любом возрасте.

Недостаток фермента в крови снижает содержание кортизола и альдостерона. Вследствие низкого уровня кортизола увеличивается секреция адренокортикотропного гормона, который способствует гиперплазии коры надпочечников, причём именно той её зоны, в которой синтезируются андрогены. Из-за этого концентрация андрогенов в крови повышается, и развивается адреногенитальный синдром.

Клинические проявления адреногенитального синдрома
Избыток андрогенов, начиная с ранних стадий развития плода, у новорождённых девочек обуславливает интерсексуальное строение наружных гениталий — женский псевдогермафродитизм. Выраженность изменений варьирует от простой гипертрофии клитора до полной маскулинизации гениталий: пенисообразный клитор с экстензией отверстия уретры на его головку.
Строение внутренних половых органов у плодов с женским генотипом при адреногенитальном синдроме всегда нормальное.

У мальчиков отмечаются увеличение размеров пениса и гиперпигментация мошонки.

У детей при отсутствии лечения в постнатальном периоде происходит быстрое прогрессирование вирилизации. Быстро закрываются зоны роста костей, в результате чего у взрослых больных, как правило, отмечается низкорослость.

У девочек при отсутствии лечения определяется первичная аменорея, связанная с подавлением гипофизарно-яичниковой системы избытком андрогенов. У взрослых женщин наблюдаются симптомы вирилизации: гипертрофия клитора, общий гипертрихоз, гирсутизм, атрофия молочных желёз, расстройство менструального цикла вплоть до аменореи. Нередко развивается бесплодие.

Надпочечниковая недостаточность развивается при сольтеряющих формах заболевания. Заболевание проявляется такими симптомами, как вялое сосание, рвота, обезвоживание, метаболический ацидоз, нарастающая адинамия. Развиваются характерные для надпочечниковой недостаточности электролитные изменения и дегидратация. Указанные симптомы в большинстве случаев манифестируют между 2-й и 3-й неделей после рождения ребенка. Одним из проявлений дефицита глюкокортикоидов является прогрессирующая гиперпигментация.

Подготовка
Генетическое обследование не требует специальной подготовки.

Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приёма пищи.

Перед диагностикой не рекомендуется подвергать себя стрессовым ситуациям, принимать спиртные напитки и курить.

Рацион и приём лекарственных препаратов не влияет на результат исследования.

Показания:

неоднократные прерывания беременности на ранних сроках;
внутриутробная гибель плода;
неудачные попытки ЭКО;
СПКЯ неустановленной этиологии;
диагностика различных формы ВДКН у детей.

Интерпретация результатов
Для интерпретации результатов генетического тестирования требуется консультация врача-генетика.

источник

66-10-905. Генодиагностика адреногенитального синдрома (11 мутаций в гене CYP21A2)

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): B03.006.003.002 «Комплекс обследований по генетической предрасположенности к дреногенитального синдрома (11 мутаций в гене CYP21A2)»

Срок выполнения (в лаборатории): 9 р.д. *

Описание

Адреногенитальный синдром (АГС) является тяжелым эндокринным заболеванием. Он носит аутосомно-рецессивный тип наследования. Может встречаться одинаково, как у мужчин, так и у женщин. Выявить большинство форм можно уже с момента рождения. Данное состояние требует обязательного лечения, так как может за короткий срок вызвать развитие осложнений. В качестве основной причины, приводящей к развитию адреногенитального синдрома, является генетическое нарушение, приводящее к недостатку фермента, участвующего в синтезировании гормонов стероидный группы, осуществляемой в надпочечниках. Чаще всего это недостаточность гена, располагающегося в области короткого плеча, относящегося к шестой хромосоме. Реже причиной выступает недостаток такого фермента, как 3-бета-ол-дегидрогеназы и 11-бета-Гидроксилаза. Патогенез заболевания сложный, связан он с тем, что вышеперечисленные ферменты понижают кортизол в сыворотке крови. Из-за того, что уровень кортизола снижается, повышается секреция адреногенитальных гормонов, способствующих гиперплазии зоны в коре надпочечников, отвечающей за синтезирование андрогена. В результате нарушения сложных биохимических процессов происходит: кортизоловая недостаточность, компенсаторно увеличивается адренокортикотропный гормон, снижается уровень альдостерона, наблюдается увеличение таких веществ, как прогестерон, 17-гидроксипрогестерон и андрогены.Врожденная гиперплазия надпочечников (ВГН) представлена группой наследственных аутосомно-рецессивных заболеваний. В 90% случаев ВГН связана с мутациями в гене CYP21A2, что приводит к снижению активности фермента гидроксилазы-21, дефициту кортизола и альдостерона, повышению уровня АКТГ, гиперплазии коры надпочечников и усилению секреции надпочечниковых андрогенов. При классических формах ВГН из-за мутаций в гене CYP21A2 происходит значимое снижение активности кодируемого фермента и развитие простой вирильной (гиперандрогенемия и нарушение развития половой системы) или сольтеряющей формы ВГН (тяжелое нарушение работы надпочечников). Врожденная гиперплазия надпочечников (ВГН) представляет собой группу наследственных аутосомно-рецессивных заболеваний, которые характеризуются нарушением работы ферментов, ответственных за метаболизм кортизола и/или альдостерона. Примерно в 90% случаев ВГН вызывается генетическими аберрациями в гене CYP21A2, что приводит к снижению активности фермента гидроксилазы-21. Изменение активности данного фермента приводит к нарушению синтеза 11-дезоксикортизола из 17-гидроксипрогестерона, что, в свою очередь, ведет к дефициту кортизола и альдостерона, повышению уровня АКТГ, гиперплазии коры надпочечников и усилению секреции надпочечниковых андрогенов. Гиперандрогения характеризуется большими размерами полового члена и небольшими яичками у лиц мужского пола. У девочек адреногенитальный синдром проявляется пенисообразным клитором, оволосением имеющим преимущественно мужской тип. Кроме того, девочки имеют признаки гиперсексуальности и грубого голоса; на фоне быстрого роста наблюдается выраженная деформация опорно—двигательной системы; люди характеризуются нестабильностью в психическом состоянии; в области кожных покровов имеются участки гиперпигментации; периодически появляется судорожный синдром. При простой форме адреногенитальный синдром у мальчиков проявляется: увеличенным в несколько раз половым членом; мошонка приобретает выраженную гиперпигментацию, так же как и анальная область; отмечается выраженный гипертрихоз; уже в детском возрасте возникает эрекция; голос у мальчика грубый, имеет низкий тембр; на кожных покровах появляются вульгарные угри; идёт выраженная преждевременная маскулинизация и ускоренное формирование костной ткани.; рост может быть достаточно низким. Постпубертатный врожденный адреногенитальный синдром проявляется: поздним наступлением менструации; менструальный цикл характеризуется выраженной нестабильностью, с нарушенной периодичностью и длительностью.имеется склонность к олигоменорее; отмечаетсяизбыточное оволосение, преимущественно по мужскому типу; кожа становится более жирной, расширяются поры в области лица; телосложение мужеподобное, характеризуется развитием широких плеч и узким тазом; молочные железы имеют небольшой размер, чаще это лишь кожная складка с недоразвитым соском.

Показания к назначению

гиперандрогения у девочек и мальчиков.

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

Исследование направлено на выявление мутаций в следующих генах: Мутация I236N, Мутация Q318X, Делеция гена CYP21A2, Конверсия гена CYP21A2, 113 bp мутация, I2G мутация, Делеция 8bp, Мутация I172N, Мутация V237E, Мутация M239K, мутация F306+T., Мутации в этих генах могут явиться причиной развития адреногенитального синдрома как у девочек, так и у мальчиков. В зависимости от вида мутаций наблюдается различная остаточная активность фермента и разные формы ВГН. Так, при делециях и конверсиях гена CYP21A2, а также при небольших делециях в 8 нуклеотидов и точечных мутациях 113 bp, I236N, V237E, M239K, I172N, F306+T, I2G активность фермента гидроксилазы-21 равна 0-5%. При данных типах аберраций развиваются простая вирильная или сольтеряющая форма ВГН. Так как ВГН, ассоциированная с мутациями в гене CYP21A2, является аутосомно-рецессивным заболеванием, то для подтверждения диагноза требуется обнаружение гомозиготной мутации либо двух гетерозиготных мутаций. Наличие одной гетерозиготной мутации повышает вероятность диагноза ВГН, но не подтверждает его. В этом случае рекомендуется проведение исследования на другие мутации в гене CYP21A2. Аналитическая чувствительность и специфичность теста составляет 99%. Представленные данные и интерпретация результатов соответствуют рекомендациям American College of Medical Genetics, а также European Molecular Genetics Quality Network.

Где сдать анализ?

Адреса медицинских центров, в которых можно заказать исследование, уточняйте по телефону 8-800-100-363-0
Все медицинские центры СИТИЛАБ в г. Самара >>

* На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории.
Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.

источник

Адреногенитальный синдром

Наша команда профессионалов ответит на ваши вопросы

Адреногенитальный синдром (АГС) – врожденное заболевание, характеризующееся прогрессирующей вирилизацией, ускоренным соматическим развитием, повышенной экскрецией гормонов коры надпочечников. Наиболее часто встречается тип гиперплазии надпочечников, вызванный дефицитом 21-гидроксилазы. Дефицит 21-гидроксилазы приводит к нарушению образования дезоксикортикостерона и 11-дезоксикортизола. Биосинтез андрогенов не нарушен, что приводит к их избыточной продукции еще при внутриутробном развитии. У новорожденных девочек отмечается разная степень маскулинизации от умеренной гипертрофии клитора до полного срастания губно-мошоночных складок с формированием предстательной железы, мошонки, полового члена с отверстием мочеиспускательного канала. Внутренние половые органы сформированы правильно, кариотип 46,ХХ. Отмечается гиперпигментация околососковой и генитальной областей. У мальчиков основными клиническими симптомами являются раннее половое развитие и низкий рост, связанный с преждевременным закрытием зон роста эпифизов.

Для вирильной формы адреногенитального синдрома, составляющей 1/3 случаев, характерны данные признаки, электролитный баланс, уровень кортизола и альдостерона в норме.
Сольтеряющая форма составляет 2/3 классических случаев адреногенитального синдрома. Кроме вирилизующего действия избытка андрогенов наблюдается нарушение солевого обмена в результате дефицита минералокортикоидов и вовлечения в патологический процесс ренин-альдостероновой системы. Заболевание проявляется в первые дни жизни срыгиванием, рвотой, потерей веса, сонливостью, признаками дегидротации, гипонатриемией, гиперкалиемией, метаболическим ацидозом.
При поздней (неклассической) форме адреногенитального синдрома отсутствуют симптомы вирилизации у девочек при рождении. Первые признаки появляются в подростковом возрасте. Для девочек характерно умеренное увеличение клитора, ускорение костного возраста, нарушение менструальной функции, маскулинное телосложение. У мальчиков признаки менее заметны, единственными симптомами могут быть ускорение костного возраста и преждевременное половое оволосение. Рост взрослых ниже среднего, фертильность снижена.
Во всех случаях заболевания отмечается повышение в моче уровня 17-кетостероидов и прегнантриола.
Тип наследования – аутосомно-рецессивный.
Популяционная частота – 1:1 000 000 неклассическая форма, 1:18 000 – классическая форма.
Ген, мутации в котором приводят к развитию АГС, картирован на хромосоме 6р21.3. Ген 21-гидроксилазы (CYP21OHB, CYP21А2) и псевдоген 21-гидроксилазы (CYP21OHA) организованы в тандем повторов с генами С4В и С4А комплемента между генами HLA-B и HLA-DR. Из-за высокой степени гомологии между повторами неравные рекомбинации и генная конверсия ответственны за большинство мутаций в этом локусе. Ген CYP21A2 состоит из 10 экзонов, имеет длину 6.3 т.п.н. Ген и псевдоген гомологичны на 98%. Гипотетический продукт псевдогена полностью не функционален. 30% обнаруженных мутаций составляет делеция гена CYP21A2. Эта мутация ответственна за развитие сольтеряющей формы заболевания. Другой мутацией, ответственной за развитие сольтеряющей формы, является мутация сайта сплайсинга во втором интроне (35%). Большинство из других мутаций в норме присутствует в псевдогене CYP21OHA и, вероятно, представляют собой результат генной конверсии. К сольтеряющей форме заболевания приводят мутации Q318X, кластер миссенс-мутаций в экзоне 6 (I235N/V236E/ M238K). Для вирильной формы характерна мутация I172N. За развитие неклассической формы заболевания с поздним началом ответственны, в большинстве случаев, мутации P30L, V281L, P453S. В Западной Европе 60% мутаций при неклассической форме АГС составляет мутация V281L.
В Центре молекулярной генетики проводится поиск 9 частых мутаций: делеции гена CYP21А2, мутации сайта сплайсинга в интроне 2, мутаций P30L, I172N, I235N/V236E/M238K, V281L, Q318X, R356W, P453S. Данный анализ проводится для больных детей с обязательным предоставленим материала их родителей. материал родителей может понадобиться для исследования т.к. при конверсии больших участков псевдогена последовательность гена CYP21А2 может включать в себя несколько мутаций. Поэтому при проведении анализа необходимо определить, находятся ли мутации на одной хромосоме или лежат на разных хромосомах. Наличие материала родителей поможет в этих случаях определить расположение мутаций на хромосомах. Также данный вид поиска мутаций возможен для родителей при отсутствии материала от больного ребенка.

Для проведения поиска частых мутаций в гене CYP21А2 (CYP21OHB) необходимо предоставить свежую кровь, взятую в пробирку с консервантом ЭДТА.

При проведении пренатальной (дородовой) ДНК-диагностики в отношении конкретного заболевания, имеет смысл на уже имеющемся плодном материале провести диагностику частых анеуплоидий (синдромы Дауна, Эдвардса, Шерешевского-Тернера и др), пункт 54.1. Актуальность данного исследования обусловлена высокой суммарной частотой анеуплоидий — около 1 на 300 новорожденных, и отсутствием необходимости повторного забора плодного материала.

источник

Адреногенитальный синдром CYP21OHB

Материал для исследования: лейкоциты периферической крови

Адреногенитальный синдром (АГС) (синонины — врожденная гиперплазия надпочечников, синдром Уилкинса) — наследственное заболевание, которое заключается в генетически обусловленном нарушении синтеза гормонов коры надпочечников. Понятие «адреногенитальный синдром» объединяет 9 нарушений в процессе ферментного биосинтеза гормонов коры надпочечников. В 90 процентах случаев возникновение АГС связано с недостаточностью фермента 21-гидроксилазы, в результате чего возникают серьезные нарушения в метаболизме гормонов. К счастью, АГС встречается не так уж часто, но и большой редкостью АГС не назовешь: примерно 1 из 5000 новорожденных страдает этим заболеванием.

Больные с адреногенитальным синдромом при рождении обычно отличаются большой массой и длиной тела, однако уже в 11–12 лет костные зоны роста у таких детей закрываются, и больные остаются низкорослыми с утрированно мужским типом фигуры: плечи значительно шире таза, туловище крупное, конечности короткие. Рано, иногда уже в период с 3 до 7 лет, у девочек обнаруживаются признаки вирилизации: понижается голос, на лице и теле появляются волосы, растущие по мужскому типу; у мальчиков с адреногенитальным синдромом в этом возрасте отмечают так называемое ложное раннее половое созревание. У новорожденных девочек отмечается разная степень маскулинизации от умеренной гипертрофии клитора до полного срастания губно-мошоночных складок с формированием предстательной железы, мошонки, полового члена с отверстием мочеиспускательного канала. Внутренние половые органы сформированы правильно, кариотип 46,ХХ. Отмечается гиперпигментация околососковой и генитальной областей.

Иногда у больных бывают периоды резкого повышения температуры тела, что объясняют выбросом в кровь избыточного количества одного из надпочечниковых андрогенов — этиохоланолона. У новорожденных девочек отмечается разная степень маскулинизации от умеренной гипертрофии клитора до полного срастания губно-мошоночных складок с формированием предстательной железы, мошонки, полового члена с отверстием мочеиспускательного канала. Внутренние половые органы сформированы правильно, кариотип 46,ХХ. Отмечается гиперпигментация околососковой и генитальной областей.

Наиболее часто развивается вирильная форма адреногенитального синдрома (до 90% больных), при которой надпочечники вырабатывают избыточное количество андрогенов, а продукция глюкокортикоидов и минералокортикоидов соответствует нижней границе нормы. При тяжелом варианте вирильной формы синдрома у плода с женским генетическим полом под влиянием надпочечниковых андрогенов неправильно формируются наружные половые органы, приобретающие сходство с мужскими. Ошибка при определении пола таких детей влечет за собой тяжелые медицинские и социальные последствия. В случае легкого течения вирильной формы синдрома девочка рождается с правильно сформированными наружными половыми органами, а признаки вирилизации появляются в пубертатном периоде.

Для вирильной формы заболевания, составляющей 1/3 случаев, характерны данные признаки, электролитный баланс, уровень кортизола и альдостерона в норме. Сольтеряющая форма составляет 2/3 классических случаев заболевания. Кроме вирилизующего действия избытка андрогенов наблюдается нарушение солевого обмена в результате дефицита минералокортикоидов и вовлечения в патологический процесс ренин-альдостероновой системы. Во всех случаях заболевания отмечается повышение в моче уровня 17-кетостероидов и прегнантриола.

Диагностика АГС основана на достаточно характерной клинической картине заболевания и лабораторных исследованиях уровня гормонов в сыворотке крови. В настоящее время разработаны технологии скрининга новорожденных. Скрининг новорожденных это массовое обследование всех родившихся живыми детей с помощью специальных лабораторных тестов для выявления некоторых тяжелых наследственных болезней до появления клинических симптомов.

Тип наследования — аутосомно-рецессивный. Популяционная частота — 1 на 5000–10000 новорожденных (классическая форма); 1 на 27–333 в зависимости от популяции (неклассическая форма).

Ген, мутации в котором приводят к развитию АГС, локализован на хромосоме 6. Ген 21-гидроксилазы (CYP21OHB — активный ген) располагается рядом с неактивным псевдогеном (CYP21OHA). Наличие рядом с кодирующим геном гомологичной ДНК-последовательности часто приводит к нарушению спаривания хромосом в мейозе и, как следствие, к изменению гена (перемещение фрагмента активного гена на псевдоген, или делеция части активного гена). В обоих случаях функция активного гена нарушается.

30% обнаруженных мутаций составляет делеция гена CYP21OHB. Эта мутация ответственна за развитие сольтеряющей формы заболевания. Другой мутацией, ответственной за развитие сольтеряющей формы, является мутация сайта сплайсинга во втором интроне (35%).

За развитие неклассической формы заболевания с поздним началом ответственны, в большинстве случаев, мутации P30L, I173N, V282L, P454S. В Западной Европе 60% мутаций при неклассической форме АГС составляет мутация V282L.

В лаборатории проводится детекция делеции гена CYP21OHB и мутации сайта сплайсинга во 2 интроне.

источник