Иммунохимический анализ крови результаты расшифровка

Иммунохимический анализ крови — расшифровка результатов

Иммунохимический анализ — это комплексное обследование, предназначенное для установления популяции клеток, количества сывороточного иммуноглобулина А, 6, М, перемещающихся иммунных комплексов, параметров лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе.

Для проведения анализа необходимо собрать материал по таким вопросам, как:

соотношение между клинической картиной и иммунными сдвигами;
отличие показателей от нормы;
данные о начале заболевания;
сведения о лечении и количестве препаратов.

Основные методы иммунохимического анализа крови

В основе проведения исследования находится специфическое воздействие антигена на антитело.

Анализы применяют для установления причины появления паразитарной инфекции, количества гормонов во время беременности, присутствия маркеров, определения группы крови.

В процессе работы находят основные титры антител к возбудителям болезни, изучают иммунную систему и ее устойчивость к инфекционному агенту.

Антиген находят с помощью сывороток крови, в состав которых входят антитела. Иммунологический анализ позволяет определить антитела по заранее известному антигену.

Для исследования берут кровь у больного в первые сутки заболевания. Диагноз ставят после проведения второго анализа через 14 дней.

Для реакции характерны 2 периода:

фаза, состоящая из связывания антигена и антитела;
результаты взаимодействия, проявляющиеся образованием иммунных комплексов.

Учитывают свойства антигена, влияющие на внешние признаки реакции, а также состав среды, концентрацию соли, температуру.

Значение исследований в клинической практике

Иммунохимические методы тестирования сывороточных белков крови при заболеваниях и в норме предоставляют материал, необходимый для установления оптимальных методов изучения. Исследуют в процессе работы динамику белка сыворотки крови, проводят анализ для определения качества плазмы при терапии заболеваний.

Минимальное количество IgM наблюдается при рождении ребенка, и нормальные показатели составляют 0,5-3,0г/л. Сывороточный IgEу новорожденных составляет 0,26±0,02 кЕ/л. Высокие уровни белка Х-СЛЦ наблюдают при злокачественных опухолях. У больных с хронической почечной недостаточностью и сахарным диабетом наибольшее значение сывороточного белка 32,5 мг/л, наименьшее -12 мг/л.

Для клинической оценки черепно-мозговой травмы иммунохимические показатели необходимы для выявления спектра белков в сыворотке крови и степени тяжести состояния больного.

Изучают свойства АФП, сывороточного альбумина СА. Определенная взаимосвязь существует между тяжестью травмы, воспалением и гипоксией, и белками крови.

У больных с травмами методом анализа определена связь между токсикозом и количеством альбумина ТСА.

Преимущества метода перед другими формами исследований

Анализ крови, выполненный на современном оборудовании, позволяет быстро поставить диагноз. Приборы для проведения иммунохимического исследования эффективно управляют коечным фондом больницы за счет ускорения получения результатов.

Экономия средств полностью покрывает затраты по аналогичному исследованию в больнице скорой помощи. Иммунохимический анализ имеет высокую специфичность, достигающую 98%, дифференцирует состав веществ с одинаковым строением. Чувствительность анализа высокая.

В схему иммунохимического анализа входит тест-система, в составе которой находится определенное антитело.

Используют для исследования моноклональные и поликлональные антитела, полученные из одной или нескольких линий клеток организма пациента. Различие антител заключается в степени их связывающей способности. Результат анализа измеряют с помощью V прямой детекции, состоящей из таких параметров, как:

Еще один вид измерения результата — V непрямая детекция, применяемая при невидимых результатах реакции. Мелкоточечное исследование позволяет выполнить анализ многих веществ по нескольким параметрам в объеме пробы 0,1-1,0 мл.

Расшифровка иммунохимического анализа крови при бесплодии

Оценка результата исследования позволяет врачу установить причину появившейся проблемы и принять меры по ее устранению. Для установления причины бесплодия врач расшифровывает уровень гормонов.

Лютеотропин помогает нормальному функционированию половых желез. Его повышенный уровень свидетельствует о появлении нарушений в их работе. В процессе обследования устанавливают свободный F3 и общий F2 эстриол.

Резкое уменьшение его количества при беременности указывает на патологию в формировании и развитии плода.

При расшифровке используют значения уровня В-ХГЧ и АФП (альфа-фетопротин). Кровь на уровень прогестерона сдают в одно и то же время суток. Исключаются накануне исследования:

стрессовые ситуации;
прием алкоголя;
курение;
питание жирными продуктами.

Иммунохимическое исследование кала

Анализ на скрытую кровь необходим для установления заболевания раком прямой кишки, эрозивных повреждениях кишечника.

Врач устанавливает такие недуги, как рак и полипы, протекающие без видимых симптомов, за исключением скрытого кровотечения. Анализ помогает больным пройти полное обследование толстого и тонкого кишечника.

Исследование устанавливает количество гемоглобина в каловых массах и не требует проведения специальных подготовительных мероприятий.

Пробирки для взятия образцов фекалий имеют стандартный размер 13х10 мм и используются для работы на любом биохимическом анализаторе. Периодичность сдачи анализа для групп населения от 40 до 75 лет составляет 1 раз в 2 года.

Экспресс-тест для установления скрытого гемоглобина в кале проводят с использованием набора агентов, в состав которого входят:

индикаторный планшет;
аппликатор;
реагент;
инструктивное письмо.

Анализ основан на реакции взаимодействия гемоглобина и специфических антител с образованием комплекса антиген-антитело. По линиям розового, фиолетового цвета в тестовой зоне, определяют величину гемоглобина, превышающую нормальный показатель.

Анализ на хламидии

Исследование крови позволяет подтвердить наличие или отсутствие возбудителя в организме больного, обладает высокой специфичностью, указывает на время заражения и вероятные осложнения для пациента. Для анализа подбирают специфические антигены. В качестве биоматериала для изучения применяют сыворотку или плазму крови. Для постановки диагноза используют иммуноглобулины — IgM, IgA, Ig6.

Метод иммунохимического исследования позволяет выявить недуг на ранних этапах его развития и определить точный тип антител. Анализ обладает высокой точностью, и пациент перед его проведением обязан соблюдать все рекомендации специалистов.

С помощью исследования выявляют стадии инфекционного заболевания и назначают антибактериальную терапию. В первичной фазе развития недуга диапазон титра Ig6 составляет более 100, но менее 6400. В процессе развития болезни от хронического течения до восстановительного периода титры растут от >100-1600 до

Расшифровка иммунохимического анализа — Лечение в домашних условиях

Иммунохимический анализ — это комплексное обследование, предназначенное для установления популяции клеток, количества иммуноглобулина А, 6, Г, которые направляются иммунных комплексов, параметров лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе.

Для проведения анализа необходимо собрать материал по таким вопросам, как:

соотношение между клинической картиной и иммунными сдвигами;
отличие показателей от нормы;
данные о начале заболевания;
сведения о лечения и количества препаратов.

Основные методы иммунохимического анализа крови

В основе проведения исследования находится специфическое влияние антигена на антитело.

Анализы применяют для установления причины появления паразитарной инфекции, количества гормонов во время беременности, присутствия маркеров, определение группы крови.

В процессе работы находят основные титры антител к возбудителям болезни, изучающие иммунную систему и ее устойчивость к инфекционному агенту.

Антиген находят с помощью сывороток крови, в состав которых входят антитела. Иммунологический анализ позволяет определить антитела по заранее известному антигену.

Для реакции характерны 2 периода:

фаза, состоящая из связывания антигена и антитела;
результаты взаимодействия, которые проявляются образованием иммунных комплексов.

Учитывают свойства антигена, влияют на внешние признаки реакции, а также состав среды, концентрацию соли, температуру.

Иммунологический метод состоит из реакции агглютинации, взаимодействия с участием комплемента, иммунодефицитного анализа, реакции преципитации.

Вернуться к змістуЗначення исследований в клинической практике

Иммунохимические методы тестирования сывороточных белков крови при заболеваниях и в норме предоставляют материал, необходимый для установления оптимальных методов изучения. Исследуют в процессе работы динамика белка сыворотки крови, проводят анализ для определения качества плазмы при терапии заболеваний.

Минимальное количество IgM наблюдается при рождении ребенка, и нормальные показатели составляют 0,5-3,0 г / л. Сывороточный ІдЕу новорожденных составляет 0,26 ± 0,02 кЕ / л. Высокие уровни белка Х-слц наблюдают при злокачественных опухолях. У больных с хронической почечной недостаточностью и сахарным диабетом наибольшее значение сывороточного белка 32,5 мг / л, менее -12 мг / л.

Изучают свойства АФП, сироватковогоальбуміну СА. Певнавзаємозв’язок существует между тяжестью травмы, воспалением и гипоксией, и белками крови.

У больных с травмами методом анализа определена связь между токсикозом и количеством альбумина ТСА.

Вернуться к змістуПереваги метода перед другими формами исследований

Анализ крови, выполненный на современном оборудовании, позволяет быстро поставить диагноз. Приборы для проведения иммунохимического исследования эффективно управляют коечным фондом больниц за счет ускорения получения результатов.

Экономия средств полностью покрывает затраты по аналогичным исследованием в больнице скорой помощи. Иммунохимический анализ имеет высокую специфичность, что достигает 98%, дифференцирует состав веществ с одинаковым строением. Чувствительность анализа высокая.

В схему иммунохимического анализа входит тест-система, в составе которой находится определенное антитело.

Используют для исследования моноклональные и поликлональные антитела, полученные из одной или нескольких линий клеток организма пациента. Разница антител заключается в степени их связывающей способности. Результат анализа измеряют с помощью V прямой детекции, состоящий из таких параметров, как:

Еще один вид измерения результата — V непрямая детекция, применяемая при невидимых результатах реакции. Мелкоточечная исследование позволяет выполнить анализ многих веществ по нескольким параметрам в объеме пробы 0,1-1,0 мл.

Вернуться к змістуРозшифровка иммунохимического анализа крови при бесплодии

Лютеотропін помогает нормальному функционированию половых желез. Его повышенный уровень свидетельствует о появлении нарушений в их работе. В процессе обследования устанавливают свободный F3 и общий F2 эстриол.

Резкое уменьшение его количества при беременности указывает на патологию в формировании и развитии плода.

При расшифровке используется значение уровня В-ХГЧ и АФП (альфа-фетопротін). Кровь на уровень прогестерона сдают в одно и то же время суток. Накануне исследования исключаются:

стрессовые ситуации;
прием алкоголя;
курение;
питание жирными продуктами.

Вернуться к змістуІмунохімічної исследование кала

Врач устанавливает такие недуги, как рак и полипы, которые протекают без видимых симптомов, за исключением скрытого кровотечения. Анализ помогает больным пройти полное обследование толстого и тонкого кишечника.

Пробирки для взятия образцов фекалий имеют стандартный размер 13х10 мм и используются для работы на любом биохимическом анализаторе. Периодичность сдачи анализа для групп населения от 40 до 75 лет составляет 1 раз в 2 года.

индикаторный планшет;
аппликатор;
реагент;
инструктивное письмо.

Анализ основан на реакции взаимодействия гемоглобина и специфических антител с образованием комплекса антиген-антитело. По линиям розового, фиолетового цвета на тестовом участке, определяют величину гемоглобина, что превышает нормальный показатель.

Исследование крови позволяет подтвердить наличие или отсутствие возбудителя в организме больного, имеет высокую специфичность, указывает на время заражения и возможные осложнения для пациента. Для анализа подбирают специфические антигены. Как биоматериала для изучения применяют сыворотку или плазму крови. Для постановки диагноза используют иммуноглобулины — IgM, IgA, Ig6.

Метод иммунохимического исследования позволяет выявить болезнь на ранних этапах его развития, и определить точный тип антител. Анализ имеет высокую точность, и пациент перед проведением обязан придерживаться всех рекомендаций специалистов.

С помощью исследования выявляют стадии инфекционного заболевания и назначают антибактериальную терапию. В первичной фазе развития недуга диапазон титра Ig6 составляет более 100, но менее 6400. В процессе развития болезни от хронического течения до восстановительного периода титры растут от gt; 100-1600 до lt; 100-400.

О наличии болезни судят через 2 недели после заражения. С помощью анализа определяют очень ранние стадии болезни с указанием пограничных титров в первой дозе сыворотки.

Необходимо предложить больному вторичное обследование для установления повторного инфицирования.

При отсутствии изменений титров антител врач отказывается от назначения лечения с помощью антибиотиков. У людей, переболевших хламидийной инфекцией, повышены антитела указывают на отсутствие инфекции.

Тестовые наборы — высококачественная аппаратура, которая не допускает появления ложных результатов.

Иммунохимический анализ крови позволяет применять комплексы тестов, определяющих белки сыворотки в норме и патологии с учетом возрастных изменений.

Анализ крови иммунологический (иммунограмма): показания, особенности проведения, расшифровка

Анализ крови иммунологический — метод, используемый специалистами в области медицины для определения возможности организма пациента сопротивляться серьезным бактериальным и вирусным заболеваниям. Результаты диагностики определяют уровень иммунной защиты, оценивая качественные и количественные показатели клеток и наличие антител в кровеносном русле.

Как работает защита организма

Чужеродные агенты (вирусы, бактерии, грибы, химические и токсические вещества), которые попадают в организм человека, называются антигенами. Иммунная система реагирует на их вторжение активной выработкой так называемых антител — специфических образований на поверхности лимфоцитов, направленных на связывание с антигенами и их дальнейшей инактивацией.

Созревание, дифференциация и образование иммунных клеток происходят в следующих органах:

костный мозг, располагающийся в больших костях;
вилочковая железа;
миндалины;
лимфатические узлы.

Очищение крови от чужеродных агентов, связанных с клетками крови, происходит в селезенке. Лимфоциты транспортируются по организму и разносятся в разные области с током лимфы по лимфатическим сосудам. Это периферический отдел иммунной системы.

Показания к проведению диагностики

Анализ крови иммунологический назначается в следующих случаях:

часто повторяющиеся заболевания инфекционного генеза;
тяжело протекающая инфекционная болезнь;
иммунодефицит приобретенного или врожденного характера;
наличие аутоиммунного заболевания;
аллергические состояния;
необходимость проведения обширных серьезных оперативных вмешательств;
послеоперационные осложнения;
контроль результатов приема иммуномодуляторов в динамике;
анорексия;
интоксикации различного характера;
опухолевые процессы;
сахарный диабет;
развитие серьезных побочных эффектов на фоне приема медикаментов.

Показатели иммунограммы не расшифровывают работники лаборатории. Результаты обследования оценивает лечащий специалист.

Иммунологическое исследование крови

Получение итоговых результатов анализа включает целый комплекс мероприятий, направленных на определение количественных и качественных показателей иммунных клеток — иммуноглобулинов. В большинстве случаев в направлении на анализ специалист указывает, какое звено в работе факторов защиты необходимо оценить.

Полная иммунограмма, цена которой находится в пределах 5-6 тысяч рублей, является довольно длительным и трудоемким скринингом, поэтому работники лаборатории определяют только те показатели, которые необходимы врачу.

Часто берут кровь на исследование следующих иммунологических факторов:

Количественные показатели сывороточных иммуноглобулинов M, A, G, E.
Компоненты комплементов С3, С4-2.
Функциональную активность иммунных клеток.
Фагоцитарный индекс.
Пролиферативную активность лимфоцитов.
Количественные показатели субпопуляций иммунных клеток.

Обзор основных показателей

Анализ на иммунограмму в первую очередь определяет уровень и показатели иммуноглобулинов. Наибольшее количество (около 75 %) занимают иммуноглобулины G. Именно они способны проникать через плацентарный барьер из организма матери в организм плода, создавая собственную защитную систему малыша.

Если анализ крови иммунологический показывает недостаточное количество IgG, это может говорить о наличии опухоли лимфатической системы злокачественного характера или об отставании человека в развитии. Высокий уровень свидетельствует о патологии печени, аутоиммунном или инфекционном заболевании.

IgM занимает десятую часть от всех остальных иммуноглобулинов. Они появляются на начальных стадия развития болезни. IgM включают ревматоидные факторы и противоинфекционные иммуноглобулины. Высокие показатели говорят о развитии цирроза или гепатита.

IgA составляют 15 % от общей массы иммуноглобулинов. Они являются факторами защиты слизистых оболочек. Анализ крови иммунологический показывает повышенный уровень при развитии красной волчанки, ревматоидного артрита, миеломы, алкогольного отравления.

В течение первых 14 дней болезни появляются IgA. На протяжении еще 7 дней к их количеству присоединяются IgM. К концу месяца от начала развития заболевания в крови можно определить антитела класса А, М и G. Пока пациент идет на поправку, IgA и IgG остаются в кровеносной системе, но их количественные показатели снижаются в 2-4 раза.

Существуют также IgE и IgD. Эти антитела появляются при аллергических проявлениях и глистных инвазиях. У здорового человека они имеют низкие показатели.

Аллоиммунные антитела

Это специфические антитела, появляющиеся в организме к антигенам эритроцитов. Их выработка может быть вызвана резус-конфликтной беременностью или переливанием крови. В основе лежит распознавание резус-фактора донорской крови как чужеродного.

Анализ назначается в следующих случаях:

период вынашивания ребенка для профилактики резус-конфликта;
наблюдение за теми беременными, которые имеют отрицательный резус-фактор;
невынашивание беременности в анамнезе;
развитие гемолитической болезни новорожденного;
обследование пациента перед переливанием крови.

Антиспермальные антитела

Иммунограмма, цена которой говорит об использовании качественных инновационных методов диагностики, позволяет оценить наличие антиспермальных антител в крови. Этот способ используется в качестве дополнительной диагностики бесплодия супружеских пар.

Антитела могут обнаруживать не только в крови, но и в слизи цервикального канала, на поверхности сперматозоидов, в плазме семенной жидкости. Сомнительные показатели находятся в пределах 55-60 Ед./мл. При получении таких результатов повторные обследования проводят через 14 дней.

Иммунодефицитные состояния

Различают первичные и вторичные иммунодефицитные состояния. Первичные — врожденные, являющиеся результатом патологии на генном уровне. Вторичные — приобретенные, которые развиваются в течение жизни под действием различных физических и биологических факторов.

Также существуют физиологические иммунодефициты, возникающие на определенных этапах развития организма:

иммунодефицит новорожденного — обусловлен переходом от наличия материнских иммуноглобулинов в крови до выработки собственных;
иммунодефицит беременных — возникает на фоне действия плацентарных стероидов на активность комплементов;
старческий иммунодефицит — объясняется снижением интенсивности выработки защитных клеток, уменьшением фагоцитарной активности нейтрофилов, макрофагов, бактерицидной активности сыворотки.

Для восстановления работы иммунной системы при развитии патологических недостаточностей используют принципы коррекции:

Инженерия иммунного характера — трансплантация костного мозга, печени, вилочковой железы, введение иммуноглобулинов, гемосорбция, иммуносорбция.
Введение гормонов и медиаторов — интерферон, интерлейкин, гормональные факторы тимуса.
Медикаментозное лечение.

Правила подготовки к анализу

Биохимические исследования требуют взятия утренней венозной крови (натощак до 12:00). За сутки до забора материала необходимо отказаться от спиртных напитков, табакокурения, ограничить физические нагрузки. Утром перед походом в лабораторию можно пить только воду.

В день сдачи крови не принимать никакие медикаменты. Если такой возможности нет, то сообщить о данном факторе работникам лаборатории, чтоб оценка результатов не была ошибочной. Биохимические исследования проводятся до любых диагностических и лечебных процедур.

Преимущества и недостатки метода

Иммунологический анализ крови, расшифровка которого проводится врачом-иммунологом или лечащим специалистом, имеет следующие преимущества:

возможность получения точных результатов;
определение заболевания на ранних стадиях развития;
проведение коррекции медикаментозной терапии после определения соотношения показателей иммунной защиты;
помощь при затруднении постановки диагноза.

Недостатком является долгий процесс диагностики при необходимости оценки полной картины, поскольку иммунных факторов, требующих пересчета количественных показателей, огромное количество.

Заключение

Иммунограмма является достоверным и точным анализом. Ее проведение требует высокой квалификации врачей-лаборантов. Расшифровка позволит определить состояние защитных сил организма, подтвердить или опровергнуть диагноз, подобрать эффективную схему лечения и повысить сопротивляемость к заболеваниям инфекционного характера.

Иммунохимический анализ крови: расшифровка и показания к сдаче

Иммунохимический анализ крови основывается на специфическом связывании соединения, которое необходимо выявить, посредством соответствующих антител.

Если пара не может зачать ребенка или только его планирует и хочет предотвратить возникновение проблем, гинеколог и андролог направит обоих партнеров на анализ крови для определения уровня гормонов.

Расшифровка результатов исследования даст возможность понять, где скрывается проблема и каким образом ее можно устранить.

Врачей интересует расшифровка на уровень многих гормонов. В каждом случае перечень может разниться в зависимости от особенностей здоровья пары. Давайте рассмотрим некоторые гормоны, уровень которых может заинтересовать врача.

Лютеотропин

Лютеинизирующий гормон или лютеотропин (лютропин). Его «производство» сосредоточено в передней доле гипофиза и им занимаются гонадотропные клетки. Они влияют на развитие и работу половых желез.

У женщин этот гормон помогает поддерживать менструальный цикл и стимулировать выработку прогестерона и эстрогенов. У мужчин – отвечает за секрецию тестостерона.

Если расшифровка анализа крови показала повышение уровня лютропина, есть повод предположить наличие первичной дисфункции половых желез, синдрома поликистозных яичников, постменопаузу, а в некоторых случаях и аденому гипофиза.

ФГС (фолликулостимулирующий гормон) вырабатывается передней долей гипофиза, отвечает за стимуляцию роста фолликулов и поддержание менструального цикла. У мужчин стимулирует выработку спермы. Во время беременности уровень ФГС резко снижается и может не определяться. Это покажет расшифровка анализа крови.

Если ФГС повышен, вероятно, угнетение функции половых желез, алкоголизм, наличие опухолей. При пониженном уровне этого гормона можно предположить нарушения в работе ЦНС, поликистоз яичников, беременность, прием гормональных контрацептивов и пр.

Пролактин

Пролактин также вырабатывается в передней доле гипофиза. Основная задача этого гормона запуск процесса лактации и его поддержание. Максимальная выработка этого гормона припадает на период ночного сна.

Начиная с 8-й недели беременности, уровень пролактина повышается и достигает максимума к концу третьего триместра. Чрезмерная секреция пролактина ослабляет работу половых желез как у мужчин, так и у женщин.

Эстрадиол

Эстрадиол свободный (Е 3) и эстрадиол общий (Е 2) используют для мониторинга беременности. На протяжении всего этого периода уровень данного гормона повышается.

Если имеет место резкое снижение уровня эстрадиола или его уровень понижен, это может быть сигналом патологического состоянии плода.

По уровню этого гормона во время проведения пренатальной диагностики проверяют риск развития синдрома Дауна.

Наиболее простой и информативный — УЗИ. Одним из наименее опасных инвазивных методов является амниоцентез. Но он позволяет дать наиболее развернутый ответ о состоянии плода.

Прогестерон

Прогестерон (П) продуцируется яичниками и корой надпочечников, а у мужчин – семенниками. Это промежуточный гормон в синтезе андрогенов. Максимальная его выработка припадает на 5-7-й день после овуляции.

Если оплодотворение не наступило, его уровень снижается, а если наступило, соответственно, повышается.

Основное диагностическое значение определения уровня данного гормона заключается в обнаружении овуляции и оценке работы желтого тела.

Также врач может написать направление на сдачу анализа крови на определение уровня: тестостерона (Т), антимюллерова гормона (АМГ), хорионического гонадотропина (ХГЧ) и пр.

Чтобы подтвердить или опровергнуть вероятную патологию, врач порекомендует понаблюдать за гормоном в динамике, для этого поможет полная расшифровка. Для этого снова нужно будет сдать анализ крови.

Чтобы расшифровка показателей была максимально точной, кровь нужно сдавать в одно и то же время суток. Следует указать и день менструального цикла или срок беременности, так как это влияет на уровень гормона.

Накануне сдачи анализа важно не переутомиться, не пить алкогольные напитки и не кушать жирную пищу. За час до забора крови следует воздержаться от курения.

Иммунохимия в диагностике заболеваний (видео)

Иммунохимические анализы очень точные

Иммунохимические исследования на сегодняшний день признаны одним из самых точных и результативных методов лабораторной диагностики, поскольку он обладает высокой точностью.

При помощи иммунохимического исследования можно:

диагностировать диабет,
диагностировать анемию,
диагностировать инфекционные заболевания,
оценивать функцию репродуктивной системы,
определять онкомаркеры,
проводить лекарственный мониторинг,
определять цитокины.

Иммунологическое исследование крови

Показания к анализу:

подозрение на наследственные отклонения, связанные с нарушением иммунных функций организма;
злокачественные опухоли;
патологии аллергической и аутоиммунной природы;
частые инфекционные заболевания (включая хронические);
комплексное обследование перед операцией по пересадке органов и после нее;
оценка эффективности назначенного лечения при всех вышеперечисленных состояниях.

Эти исследования крови позволяют комплексно оценить состояние защитных функций человеческого организма, поскольку оно наглядно показывает количество и все свойства иммунных клеток. Иммунохимический анализ также позволяет анализировать присутствие в крови тех или иных антител. Одним словом, иммунограмма — это целостная картина состояния иммунитета человека.

Иммуноферментный анализ крови

ИФА-исследование крови необходимо для выявления присутствия или отсутствие антител. Это высокоинформативный метод ранней диагностики различных инфекций.

Иммунохимические методы исследования мочи

Иммуноэлектрофоретический анализ уропротеинов помогает изучить качественный состав белков мочи, что важно для дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита.

Анализ на гормоны репродуктивной сферы

Анализы на гормоны репродуктивной сферы очень важны для диагностики и лечении многих заболеваний.

Что может входить в этот анализ? Перечислим основные составляющие:

Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)
Лютенизирующий гормон (ЛГ)
Пролактин
Эстрадиол свободный (Е3)
Эстрадиол общий (Е2)
Прогестерон
Тестостерон
17-гидроксипрогестерон (17-ОН-Р)
Тестостерон свободный
Дегидроэпиандростерон-сульфат (ДГЭА-С)
Дигидротестостерон (ДГТ)
Анти-мюллеров гормон (АМГ)
Андростендион
Глобулин, связывающий половые гормоны (ГСПГ)
Андростендиол глюкуронид
Ассоциированный с беременностью плазменный протеин A (PAPP-A)
Плацентарный лактоген (ПЛ)
Свободная ?-субъединица ХГЧ (свободный ?-ХГЧ)
Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ)

Где можно пройти диагностику всего организма? Где можно сдать анализы в Москве? ответ очевиден — в клинике Neo Vita в Крылатском.

У нас вы можете не только пройти медицинское обследование, но и сделать диагностику психосоматического баланса организма — 4D диагностику здоровья.

В нашем отделении диагностики вы можете сдать анализы платно, пройти ультразвуковую диагностику, записаться на консультацию к неврологу.

Иммунохимические методы анализа в клинической лаборатории. — презентация

1 Иммунохимические методы анализа в клинической лаборатории
2 Иммунохимические методы исследований Иммунохимические методы исследований – методы, основанные на специфической реакции взаимодействия антигена с антителом. Cфера применения — показаны в ситуациях, когда необходимо количественно определить концентрации химических веществ, содержащихся в очень низких концентрациях в биологическом материале. Белки сыворотки крови: Иммуноглобулины, липопротеины Опухолевые маркёры: Раково-эмбриональный антиген (РЭА), альфа-фетопротеин и др. Гормоны Инфекционные маркёры: Нbs Ag,Anti-HIV Маркеры воспаления: Ревматоидный Фактор, С- Реактивный Белок Лекарственные вещества: Теофиллин, Дигоксин, Фенитоин и др.
3 Специфичность и чувствительность иммунохимических методов Специфичность: иммунохимические методы высокоспецифичны (95-98%), можно легко и точно дифференцировать в биологической пробе химические вещества, имеющие очень схожую молекулярную структуру (например, Тироксин и Трийодтиронин). Чувствительность: При помощи иммунологических методов исследования в биологической пробе можно определить химические вещества в концентрациях вплоть до моль/л
4 Принцип иммунологических методов исследования Основа технологии любого иммунологического метода исследования – реакция между антигеном и антителом. Антиген — вещество, распознающееся иммунной системой Антитела (иммуноглобулины) — белки, специфически реагирующие с Аг. Антиген подходит к определенному антителу как «ключ к замку».
5 Общая схема строения иммуноглобулинов
6 Схема взаимодействия антигена с комплементарным ему антителом
7 Перекрестное взаимодействие. Связывание вещества, структура которого очень схожа со структурой антигена, с соответствующим антителом называется перекрёстной реакцией Связывающее сродство в перекрестных реакциях как правило более низкое чем в процессе реагирования между абсолютно специфичными партнёрами.
8 Методы иммунохимического тестирования Ag + At = Комплекс AgAt. 1.Детекция антигена — тест-система должна иметь в своём составе соответствующее антитело (для определения концентрации дигоксина надо иметь в тест- системе антитела к нему) 2.Детекция антител — тест-система должна содержать в своём составе соответствующий антиген (для определении антител к НbSAg в тест системе должен содержаться синтетический HbSAg) 3.Детекция иммунного комплекса (т.е. связанных между собой Антигена и Антитела) – реакция преципитации, агглютинации и т.д. ( в зависимости от молекулярной массы и концентрации в сыворотке крови исследуемого антигена
9 Антитела, применяемые в иммунохимических тест-системах 1.Моноклональные антитела — полученные от одной клеточной линии ( клона), синтезируются клетками гибридомы. Такие Ат при взаимодействии со специфическим антигеном обладают одинаковой специфичностью и связывающей способностью. 2.Поликлональные антитела — смесь антител, полученных от различных клеточных линий. Получают из сыворотки иммунизированных животных. Антитела в такой смеси могут различаться по связывающей способности.
10 Иммунохимические методы – основные технологические подходы Не предусматривается использование «твёрдой фазы» Отсутствуют процедуры разделения между несколькими реакционными стадиями Выполняются относительно быстро. Гомогенные иммунохимические методы
11 Иммунохимические методы — основные технологические подходы (продолжение) Устраняется влияние на процесс исследования других компонентов, содержащихся в исследуемой пробе. Чувствительность выше.
12 Основные виды гетерогенного иммунохимического анализа 1.Конкурентные методы 2.Сэндвич-методы
13 Иммунохимические методы — основные технологические подходы (продолжение) 3.Иммунохимические методы на основе диффузии и электрофореза Растворённый АГ + растворённое АТ (в жидкостях или в гелях) преципитат (АГ+АТ) детекция визуально, либо при помощи измерительной аппаратуры. Необходима точность в соотношении концентраций между антигенами и антителами. Пассивная иммунодифузия антигена и антитела может быть активизированна при помощи различных электрофоретических методик.
14 Изменение свойств преципитата в зависимости от соотношения АГ:АТ

Иммуноферментный анализ (ELISA)

Наиболее часто на практике используются три варианта твердофазного иммуноанализа — непрямой иммуноанализ, прямой иммуноанализ и иммуноанализ сэндвич-типа. Различия между этими типами иммуноанализа заключаются в следующем. В непрямом варианте иммуноанализа на первой стадии на поверхность лунок полистирольного планшета сорбируется антиген.

После удаления несвязавшихся молекул антигена добавляется образец, содержащий специфичные к данному антигену антитела. Образовавшиеся комплексы антиген-антитело детектируются с помощью анти-видовых антител, конъюгированных с какой-либо меткой (Рис. 1А).

В прямом варианте иммунанализа детекция сорбированного антигена осуществляется непосредственно с помощью специфичных антител, конъюгированных с меткой (Рис. 1Б). В иммуноанализе сэндвич-типа на первой стадии на поверхность планшета сорбируется не антиген, а антитела, специфичные к исследуемому антигену (антитела подложки).

После удаления не связавшихся молекул антител добавляется образец, содержащий антиген. Для детекции образовавшегося комплекса антитела подложки-антиген добавляются вторые антитела, специфичные к другому, пространственно удаленному, эпитопу антигена, конъюгированные с какой-либо меткой (Рис. 1В).

Использование в иммуноанализе сэндвич-типа антител, специфичных к двум различным эпитопам антигена, позволяет добиться высокой чувствительности и специфичности при определении антигена даже в таких гетерогенных образцах, как плазма крови.

Рис. 1. Принцип непрямого (А), прямого (Б) и иммуноанализа сэндвич-типа (В)

Непрямой иммуноферментный анализ (indirect ELISA)

Метод непрямого иммуноанализа характеризуется осуществлением 3-х стадийного процесса, на первой стадии которого антиген адсорбируется на специально подготовленном пластике, на второй с антигеном взаимодействуют специфичные к нему антитела, а на третьей в систему вводят антивидовые антитела, конъюгированные с ферментом, обуславливающим проведение индикаторной ферментативной реакции. В данной методике в качестве фермента используют пероксидазу хрена. Реакция проводится в специальных 96-луночных планшетах.

I. Сорбция антигена

В лунки 96-луночного планшета для проведения иммуноанализа сорбируют антиген 0,1-0,5 мкг в лунку в 100 мкл фосфатно-солевого буфера (PBS). Инкубация проводится в течение 30 минут при комнатной температуре и встряхивании на горизонтальном шейкере для планшетов. Отмывка (2-х кратная) несвязавшихся молекул антигена осуществляется фосфатно-солевым буфером содержащим 0.1% Tween-20 (PBSТ).

Для блокирования мест неспецифического связывания лунки планшета заполняют PBST и инкубируют в течение 10-15 минут при комнатной температуре.

III. Раститровка специфичных антител

Раститровку можно проводить как по горизонтальным, так и по вертикальным рядам планшета. Необходимо отметить, что раститровка антител проводится в том случае, если необходимо подобрать оптимальную концентрацию антител или определить титр. В том случае, если оптимальная концентрация и/или титр антител определены, то используют рекомендованное для данных конкретных антител разведение.

При раститровке в первую лунку ряда вносят готовое разведение антител — в среднем 1-10 мкг в лунку, далее проводят последовательное разведение антител в лунках. Инкубацию со специфичными антителами проводят в течение 30 минут при комнатной температуре и встряхивании на горизонтальном шейкере для планшетов. Отмывка осуществляется с помощью PBSТ 3 раза.

В качестве детекторных (вторичных) антител используются антивидовые поликлональные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена. Чаще всего используются козьи или кроличьи антитела, специфичные к целой молекуле или к Fc-фрагментам специфичных антител.

Концентрация детекторных антител как правило указывается производителем в виде разведения исходного раствора (например, 1:1000). Инкубация со вторичными антителами проводится в течение 30 минут при комнатной температуре и встряхивании на горизонтальном шейкере для планшетов.

Отмывка осуществляется с помощью PBSТ 5-6 раз.

Пероксидаза хрена катализирует реакцию окисления субстрата перекисью водорода. В качестве субстрата пероксидазы хрена используется о-фенилендиамин (ОФД). В результате прохождения реакции образуется окрашенный продукт окисления ОФД.

Раствор субстрата: К 10 мл субстратного буфера (0,1 М Na-цитратный буфер, рН 4,5) добавить 0,01 мл 30% перекиси водорода и 0,2 мл 50х раствора ОФД (340 мг ОФД в 10 мл этилового спирта; хранить при –20°С).

Инкубация проводится в течение 10 минут при комнатной температуре и встряхивании на горизонтальном шейкере для планшетов.

Перед измерением оптической плотности проводят остановку цветной реакции с помощью 0,5 М H2SO4. В лунки с рабочим раствором ОФД после инкубации вносят по 50 мкл раствора 0,5 М серной кислоты. После этого можно сразу приступать к измерению оптической плотности.

Оптическая плотность раствора окрашенного продукта измеряется при λ=490 нм с использованием планшетного спектрофотометра.

Прямой иммуноферментный анализ (direct ELISA)

Методика прямого иммуноанализа имеет лишь небольшие отличия по сравнению с методикой непрямого иммуноанализа. Так, стадии I и II одинаковы в обоих типах анализа.

Отличие заключается в том, что в прямом варианте иммуноанализа на стадии III используют специфичные антитела, конъюгированные с ферментной меткой.

При необходимости также можно проводить раститровку специфичных антител, конъюгированных с ферментной меткой, аналогично описанному ранее для неконъюгированных антител. Стадия IV опускается, а дальнейшие стадии (V-VII) проводятся аналогично описанному выше для непрямого варианта иммуноанализа.

Иммуноанализ сэндвич-типа (Sandwich-type immunoassay)

Рис. 2. Схематическое изображение иммуноанализа «сэндвич»-типа. АТп — антитело подложки, АТд — детекторное антитело, АГ — антиген, М — метка, ковалентно связанная с детекторным антителом, П — подложка, на которую сорбируется антитело подложки.

В данном варианте иммуноанализа (Рис.2) используется пара антител, специфичных к пространственно удаленным эпитопам исследуемого антигена.

I. Сорбция антител подложки

В лунки 96-луночного планшета для проведения иммуноанализа сорбируют антитела подложки 1-2 мкг в лунку в 100 мкл фосфатно-солевого буфера (PBS).

Инкубация проводится в течение 30 минут при комнатной температуре и встряхивании на горизонтальном шейкере для планшетов.

Отмывка (2-х кратная) несвязавшихся молекул антигена осуществляется фосфатно-солевым буфером содержащим 0,1% Tween-20 (PBSТ).

II. Блокировка

Для блокирования мест неспецифичного связывания лунки планшета заполняют PBST и инкубируют в течение 10-15 минут при комнатной температуре.

III. Инкубация с антигеном

В лунки планшета с преадсорбироваными антителами вносят по 50 мкл исследуемого раствора либо стандартных разведений антигена.

Разведения антигена должны быть приготовлены на основе PBST, поскольку Tween-20 снижает неспецифичное связывание белковых молекул друг с другом и с поверхностью планшета.

И исследуемый раствор, и стандартные разведения антигена вносят попарно (либо по 3 повторности), используя по две (три) лунки на каждое разведение белка. Инкубацию проводят при комнатной температуре в течение 30 мин при постоянном перемешивании. Отмывка осуществляется раствором PBST 3 раза.

IV. Инкубация с антителами, конъюгированными с ферментной меткой

В лунки планшета вносят по 100 мкл раствора специфичных антител, конъюгированных с ферментной меткой.

Оптимальная концентрация конъюгированных антител как правило указывается производителем (обычно используют концентрацию 2-4 мкг/мл).

Инкубация с антителами, содержащими ферментную метку, проводится в течение 30 минут при комнатной температуре и встряхивании на горизонтальном шейкере для планшетов. Отмывка осуществляется с помощью PBSТ 5-6 раз.

V. Проведение ферментативной реакции, сопровождающейся появлением окрашенного продукта

В лунки вносят по 100 мкл раствора субстрата и инкубируют в течение 10 мин при комнатной температуре и постоянном перемешивании.

VI. Остановка ферментативной реакции

Перед измерением оптической плотности проводят остановку цветной реакции с помощью 0,5 М H2SO4. В лунки с рабочим раствором ОФД после инкубации вносят по 50 мкл раствора 0,5 М серной кислоты. После этого можно сразу приступать к измерению оптической плотности.

VII. Измерение оптической плотности

источник