Пцр в общем анализе крови

Что показывает анализ крови на ПЦР? Как подготовиться к анализу

Диагностика инфекционных заболеваний разного типа – как вирусных, так и бактериальных – направлена на выявление возбудителей на ранней стадии, что даёт возможность назначить своевременное и особенно эффективное лечение. Самым современным методом обнаружения инфекций является ПЦР, который расшифровывается как полимеразная цепная реакция. В чём суть данного метода и с какой целью он проводится?

Сущность полимеразной реакции

В структуре любого вируса и микроорганизма содержатся молекулы РНК или ДНК. Характерно, что у каждого данные соединения являются уникальными, в связи с чем, выделяя в анализе крови у взрослых или у детей нуклеиновые кислоты, можно поставить диагноз с абсолютной точностью.

К несчастью, концентрация ДНК как в образцах крови, так и в иных биологических материалах, довольно низкая, поэтому посредством обыкновенных диагностических методов её не получается определить. Для того чтобы справиться с данной проблемой, в своё время изобрели цепную полимеразную реакцию.

Итак, сущность данного анализа заключается в специфической обработке кровяного образца, благодаря которой в ней повышается концентрация молекул ДНК, и установление их типа в дальнейшем даёт возможность выявить вид возбудителя, а также поставить верный диагноз.

Как проводится анализ крови на ПЦР

Метод ПЦР осуществляется только в лабораторных условиях. Чтобы его провести, используются особые ферменты, увеличивающие структуру РНК и ДНК пациента в несколько раз. При этом должно сформироваться такое их количество, чтобы стало возможным проведение визуального исследования. В течение обследования осуществляется копирование такого участка, который подходит под требуемые условия по всем параметрам. Что такое анализ крови ПЦР на РНК, интересно многим.

В лаборатории имеется в наличии необходимая база данных, где указывается точная структура разнообразных инфекционных агентов. Использование метода ПЦР позволяет не просто установить вид возбудителя, но и высчитать его количественную пропорцию.

ПЦР-диагностика включает в себя также и некоторые новшества, в числе которых выделяются следующие:

— соединение различных фрагментов ДНК;

— установление отцовства и т. п.

Какие заболевания выявляются благодаря ПЦР?

Благодаря ПЦР возможно выявление практически всех бактериальных и вирусных патологий. Для исследования может использоваться не только кровь, но и иные биологические материалы, такие как мазки из уретры и из маточной шейки, слюна, сперма. Анализ становится достаточно информативным тогда, когда возбудитель определённого заболевания попадает в кровь человека. Именно поэтому анализ крови на ПЦР назначается при следующих патологиях:

— вирусные гепатиты типа А, В, С, D и TT;

— инфекция герпетического характера (то есть вирусы первого, второго и четвёртого типов);

Если принять во внимание осуществление ПЦР с помощью иных биоматериалов, то в перечень патологий, которые можно выявить благодаря данному способу, нужно добавить следующие:

— папилломавирусную инфекцию (около ста разнообразных штаммов вируса человеческой папилломы).

Особую актуальность приобрёл в настоящее время ПЦР-анализ крови в период беременности на TORCH-инфекции, к которым относятся токсоплазмоз, цитомегаловирус, герпесвирусная инфекция и краснуха. Это связано с тем, что вышеперечисленные заболевания способны вызвать отклонения в развитии плода.

Плюсы ПЦР

В чём же заключаются преимущества данного метода?

Стопроцентная точность диагностики: при наличии в крови хотя бы нескольких ДНК-фрагментов возбудителя они будут определены реакцией ПЦР, а значит, будет поставлен правильный диагноз. Именно в этом заключается основное отличие подобного метода от иных способов диагностики – общего анализа крови, ИФА и других.
Специфичность. Во время осуществления анализа крови ПЦР на боррелиоз, например, нет такого понятия, как ложноотрицательный или ложноположительный результат, что отличает его от иммуноферментного анализа, или ИФА.
Анализ можно проводить с целью определения сразу нескольких возбудителей на основе одного образца биоматериала, благодаря чему данный метод становится удобным для пациента, ведь ему не придётся сдавать анализ несколько раз.
Быстрота. Нет необходимости в выделении и выращивании возбудителя на особых питательных средах, что необходимо во время бактериологического обследования. Получить готовый результат можно уже непосредственно в день сдачи анализа.

Посредством анализа крови ПЦР на гепатит, к примеру, производится определение скрытого возбудителя заболевания в организме, когда пациент выступает в качестве носителя инфекции (ВИЧ или гепатита).
Доступная цена. Стоимость анализа ПЦР для определения одного возбудителя колеблется в пределах от двухсот пятидесяти до пятисот рублей. Полуколичественное обследование на вирусы стоит немного дороже – около тысячи рублей.

Недостатки метода

ПЦР представляет собой высокотехнологичный исследовательский метод, предъявляющий повышенные требования к лабораторному оснащению. Помещение для проведения анализа должно обязательно иметь фильтр биологической очистки, поскольку в воздухе всё время имеются частицы слюны и кожи, в составе которых содержатся молекулы ДНК. Если не соблюдать технические требования к работе с биоматериалами, то это способно стать причиной неправильного диагноза.

Кто должен сдавать анализ крови на ПЦР?

Пройти исследование может любой человек. Показанием к нему выступает подозрение на передающиеся половым путем инфекции (ВИЧ-инфекция, гарднереллез, хламидиоз). Если случайно произошёл незащищенный половой контакт, исключительно ПЦР позволит поставить верный диагноз ещё на раннем этапе, в случае если человек заразился тем или иным заболеванием.

Кровь на TORCH-комплекс в обязательном порядке сдаётся беременными женщинами, а также теми, кто пока только планирует зачать ребёнка.

Хотя ПЦР – это максимально эффективный способ диагностики, только на нём зацикливаться не нужно. Обследовать пациента при наличии любой патологии необходимо комплексно. Если цепная полимеразная реакция даёт возможность определения возбудителя, то благодаря серологическому исследованию можно оценить уровень эффективности терапии, реакцию организма человека на возбудителя и медикаментозные средства. Анализ крови ПЦР на ВИЧ должен назначаться врачом.

Особенности процедуры и подготовки

Пациенты, которые обследуются с помощью ПЦР-методики, получают самый достоверный результат. Нужно сказать, что при этом вероятность ошибок практически полностью исключается. Довольно быстро готовятся и результаты данного анализа, благодаря чему облегчается определение диагноза и становится возможным своевременное назначение необходимых лечебных процедур.

Достоверность результата, полученного методом ПЦР, обусловливается правильностью сдачи биологического материала на обследование. Он не должен быть чем-либо загрязнен, в противном случае результат не будет объективным.

запрет на половые контакты за сутки до процедуры;
анализ крови для выявления инфекций нужно сдавать утром и только на голодный желудок;
моча также сдаётся в утреннее время в стерильный контейнер.

Через полтора или два дня после проведения процедуры будет произведена расшифровка анализа крови ПЦР и готов результат. Бывают даже такие случаи, когда получить результат можно в тот же день.

Как подготовить материал к анализу?

Для того чтобы максимально успешно провести исследование, необходимо правильно взять у пациента материал и провести грамотную его подготовку. Общеизвестным является тот факт, что в лабораторном исследовании большое количество ошибок (примерно до семидесяти процентов) случается как раз-таки во время пробоподготовки.

В настоящее время в некоторых лабораториях кровь берётся с помощью вакуумных систем. С одной стороны, они в минимальной степени травмируют пациента, с другой – дают возможность взять материал так, чтобы он не контактировал ни с окружающей средой, ни с персоналом. Благодаря этому можно избежать загрязнения биологического материала и максимально обеспечить достоверность анализа.

Расшифровка результатов

Результат анализа крови на ПЦР может быть положительным и отрицательным. Если анализ крови отрицательный, то это свидетельствует об отсутствии инфекционных возбудителей в сданном пациентом материале. Положительный анализ выступает подтверждением того, что в крови имеются инфекционные агенты, а значит, требуется в максимальной степени эффективное и качественное лечение пациента.

Полученный результат может быть положительным даже при отсутствии каких-либо симптомов заболевания. Это свидетельствует или о начале патологического процесса, или о том, что человек является носителем. В случае выявления последнего не требуются какие-либо лечебные процедуры. Пациенту в таком случае рекомендуется постоянно наблюдаться у врача, что подразумевает, например, периодическое исследование анализа крови ПЦР на герпес и другие инфекции.

Чаще всего они обнаруживаются в уретре, в соскобе, произведённом из цервикального канала, в слюне. Однако нужно помнить о том, что больной человек способен заразить совершенно здоровых людей, даже в том случае, если его никак не беспокоит данное заболевание. Оно может приобрести хронический характер. Нужно сказать, что при положительном результате, полученном с помощью ПЦР, необходимо назначение соответствующих лечебных процедур.

Количественная характеристика ПЦР

Анализ крови ПЦР на инфекции характеризуется ещё и количественно. Такой результат может оцениваться исключительно специалистом, поскольку для различных инфекций он индивидуален. Именно количественная характеристика позволяет врачу определить степень активности такого патологического процесса, определить точный этап развития определённого заболевания.

Исследование полученных результатов поможет специалисту выбрать соответствующее лекарственное средство, конкретизировать необходимую дозировку.

Точность диагностики

Выделяется три самых важных характеристики ПЦР, а именно:

Диагностика инфекций с помощью ПЦР отличается высокой вероятностью обнаружения в организме инфекционных агентов. Анализ крови и иных жидкостей является высокоспецифичным. Благодаря ему можно с лёгкостью определить конкретный инфекционный процесс, сдав, к примеру, анализ крови ПЦР на гепатит или ВИЧ. Также диагностика ПЦР отличается повышенной чувствительностью. При наличии в исследуемом материале минимального количества инфекционных агентов способ ПЦР всегда будет положительным.

В очень редких случаях может быть получен ложноположительный результат. При отсутствии инфекции он, соответственно, будет отрицательным.

Выявление скрытых заболеваний

При подозрении у человека ИППП назначается анализ крови на определение скрытых инфекций. Любые заболевания половой сферы можно определить только с помощью обследования пациента.

уреаплазмоз;
хламидиоз;
микоплазмоз;
герпес;
гонорея;
гарднереллез.

Данные инфекции являются достаточно распространёнными и очень коварными. В начале заболевания они не имеют хорошо выраженных симптомов, поэтому пациенты не обращаются к специалисту. Результаты своевременного анализа крови ПЦР на хламидии, боррелиоз и прочие инфекции помогут врачу назначить эффективное лечение.

ИППП отрицательно воздействуют на репродуктивную систему. Они могут стать причиной бесплодия либо появления у плода пороков. Именно поэтому важно перед планированием беременности сдать анализ ПЦР.

источник

Что такое анализ крови на ПЦР, и зачем он нужен

Диагностика инфекционных заболеваний – бактериальных и вирусных – направлена на раннее выявление возбудителей, что позволяет назначать раннюю и максимально эффективную терапию. Самым современным способом диагностики инфекций является ПЦР или полимеразная цепная реакция. Так что же это за метод, и для чего он нужен?

Суть полимеразной реакции

Любой микроорганизм и вирус содержат в своей структуре молекулы ДНК или РНК. У каждого из них эти соединения уникальны, поэтому, если выделить в анализе крови у детей или взрослых нуклеиновые кислоты, можно с абсолютной точностью поставить диагноз.

К сожалению, концентрация ДНК в образцах крови или других биологических материалах достаточно низка и с помощью обычных методов диагностики определить ее не получается. Чтобы справиться с этой проблемой, была изобретена полимеразная цепная реакция.

Сущность ПЦР заключается в специальной обработке образца крови, в результате чего в ней увеличивается концентрация ДНК молекул, определение типа которых в дальнейшем позволяет установить вид возбудителя и поставить диагноз.

Как сдать кровь на ПЦР

При подготовке к анализу следует придерживаться общих рекомендаций: не пить и не есть непосредственно перед анализом крови. Хотя для сдачи крови на ПЦР можно так строго не придерживаться этих требований, так как точность исследования не зависит от того, на сытый или голодный желудок был взят анализ.

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР

С помощью ПЦР можно выявить практически любые вирусные и бактериальные заболевания. Для анализа используется не только кровь, но и другие биологические материалы: сперма, слюна, мазки из уретры и с шейки матки. Анализ крови будет информативен в том случае, если возбудитель конкретного заболевания проникает в кровь человека. Поэтому ПЦР крови назначают при следующих заболеваниях:

вирусные гепатиты А, В, С, D и TT;
цитомегаловирус;
герпетическая инфекция (вирусы герпеса 1, 2 и 4-го типов);
ВИЧ-инфекция
энтеровирусная инфекция;
опоясывающий лишай;
краснуха;
токсоплазмоз;
инфекционный мононуклеоз;
листериоз.

Если же взять во внимание возможность проведения ПЦР других биоматериалов, то в список заболеваний, выявляемых с помощью ПЦР, следует добавить:

Особо актуально в настоящее время ПЦР анализа крови беременной на так называемые TORCH-инфекции: цитомегаловирус, токсоплазмоз, краснуху и герпесвирусную инфекцию. Связано это с тем, что упомянутые заболевания могут привести к аномалиям развития плода.

Преимущества ПЦР

100% точность диагностики – если в крови есть даже несколько фрагментов ДНК возбудителя, с помощью ПЦР они буду выявлены, и будет поставлен точный диагноз. Это главное отличие данного метода от других способов диагностики – ИФА, общего анализа крови и прочих.
Специфичность. При проведении ПЦР отсутствует такое понятие, как ложноположительный или ложноотрицательный результат. В отличие от иммуноферментного анализа (ИФА).
Возможность проведения анализа сразу на несколько возбудителей из одного образца биоматериала, что делает метод удобным для пациента – не нужно несколько раз сдавать анализ.
Быстрота. Не нужно выделять и выращивать возбудителя на питательных средах, как это делается при бактериологическом исследовании. Результат может быть готов уже в день сдачи анализа.
С помощью ПЦР выявляют возбудителей латентных заболеваний, когда возбудитель в организме есть, но он еще не вызвал заболевание, или когда пациент является носителем инфекции (гепатита или ВИЧ).
Низкая стоимость. Цена анализа ПЦР на одного возбудителя составляет 250-500 рублей. Чуть дороже стоит полуколичественный анализ на вирусы – около 1000 рублей.

Недостатки анализа

ПЦР является высокотехнологичным методом исследованием и предъявляет высокие требования к оснащению лаборатории. Помещение, где делают анализ, обязательно должно быть оснащено фильтром биологической очистки, так как в воздухе постоянно присутствуют частицы кожи, слюны, содержащие в своем составе молекулы ДНК. Несоблюдение техники работы с биоматериалами может стать причиной неверного результата.

Анализ крови – расшифровка у взрослых (ПЦР)

Трактовка результатов этого исследования не представляет сложностей, потому что отсутствует таблица норм анализа крови на ПЦР. В бланке результатов могут фигурировать лишь две фразы:

отрицательный результат – возбудитель, на который проводился анализ, не выявлен;
положительный результат – в организме имеется возбудитель указанного заболевания.

Следует знать, что ПЦР может быть положительной даже при отсутствии клинических симптомов заболевания! Расшифровка анализа крови на ПЦР у детей не отличается от таковой у взрослых.

Кому нужно сдать анализ на ПЦР

Любой человек может сдать кровь для исследования. Прямым показанием для исследования является подозрение на инфекции передающиеся половым путем (хламидиоз, гарднереллез, ВИЧ-инфекция). При случайном незащищенный половом контакте только ПЦР поможет поставить диагноз на ранней стадии, если человек заразился каким-либо заболеванием. В обязательном порядке кровь на TORCH-комплекс сдают беременные женщины. А также женщины, только планирующие беременность.

Хотя ПЦР является максимально эффективным методом диагностики, зацикливаться только на нем не стоит. Обследование пациента при любом заболеваний должно носить комплексный подход. Если цепная полимеразная реакция позволяет выявить возбудителя, то серологическое исследование позволяет оценить эффективность лечения, реакцию организма на возбудителя и лекарства. Назначать все исследования должен врач по показаниям.

Увидеть, как выполняется анализ крови ПЦР, вы сможете, просмотрев данный видео-обзор:

Гудков Роман, врач-реаниматолог

42,427 просмотров всего, 18 просмотров сегодня

источник

Анализы ПЦР на 12 инфекций: сущность и правила сдачи

ПЦР диагностика — это методика, основанная на применении полимеразной цепной реакции, с помощью которой можно обследовать человека на инфекционные и наследственные заболевания. Анализы ПЦР на 12 инфекций показывают результат, несмотря на то, остро протекает заболевание или хронически. Некоторые специалисты считают ПЦР 12 обязательным анализом и не ставят без него окончательный диагноз. Результаты могут быть положительными даже задолго до появления симптоматики болезни.

В 20 веке Кэри Мюллис из США открыл явление полимеразной цепной реакции. В настоящее время метод ПЦР является золотым стандартом в некоторых сферах медицины. Метод является максимально эффективным для выявления болезни в активной стадии, поскольку бывают случаи, что в активной стадии обычные методы не дают такого точного результата.

Преимущества ПЦР диагностики

Диагностика инфекционных процессов при помощи ПЦР достаточно актуальна в современном мире. Преимуществами данного вида обследований являются следующие моменты:

Обнаружение инфекционного возбудителя в анализах. Анализ предполагает выявление ДНК или РНК инфекционного агента.
Практически исключены ложные и ошибочные реакции.
Методика ПЦР 12 максимально чувствительная. Благодаря данному методу можно обнаружить даже единичные клетки инфекционных агентов.
Результат ПЦР на скрытые возбудители готов уже через 4 часа после проведения процедуры.
Способность обнаружения инфекционных агентов без отсутствия характерной симптоматики для заболевания. Метод достаточно эффективен и по происшествии конкретной болезни.

В современном мире ПЦР диагностика инфекций развивается ускоренными темпами. Методика активно совершенствуется. Появляются новые подвиды обследования ПЦР. Благодаря развитию данного метода обследования он становится максимально доступным широкому кругу людей, а стоимость при этом постепенно изменяется.

Основа полимеразной цепной реакции

Метод ПЦР проводится исключительно в лабораторных условиях. Для его осуществления используются специальные ферменты, которые увеличивают в несколько раз структуру ДНК и РНК больного. Должно образоваться такое число ДНК и РНК, чтобы можно было провести визуальный анализ. Во время обследования происходит копирование того участка РНК или ДНК, который идеально подходит под требуемые условия.

В лаборатории существует соответствующая база данных, в которой указано точное строение различных инфекционных агентов. Благодаря методу ПЦР можно не просто увидеть возбудителя, но и подсчитать его количественное соотношение.

ПЦР-диагностика предполагает и определенные новшества, среди которых можно выделить следующие:

введение мутаций;
соединение отдельных фрагментов ДНК;
определение отцовства и др.

Инфекции, выявляемые ПЦР-анализом

ПЦР диагностика может выявить следующие инфекционные процессы:

ВИЧ;
гепатиты следующих разновидностей: А, В, С, G;
вирус Эпштейн-Барра, возбудитель инфекционного мононуклеоза;
цитомегаловирус;
микобактерии туберкулеза;
герпес 1 и 2 типа;
многие инфекции, передающиеся половым путем: уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз.
ВПЧ и его онкогенные подвиды;
клещевой энцефалит и боррелиоз;
кандидозная инфекция;
листериоз;
инфекция хеликобактер пилори.

И это лишь часть наиболее распространенных инфекций, которые можно выявить при помощи ПЦР. ПЦР анализ крови активно применяется в гинекологической сфере медицинской практики, а также в таких областях, как:

пульмонологическая;
фтизиатрическая;
гастроэнтерологическая;
онкологическая;
многие другие разделы медицины.

Правила сбора материала на анализ

Чужеродные ДНК и РНК можно выявить, обследовав разнообразные биологические жидкости конкретного человека. Для того чтобы обследовать человека на присутствие определенных инфекций, передаваемых половым путем, необходимо взять на пробу выделения из половых органов (мазок или соскоб) больного и его мочу.

Если возникла необходимость обследовать человека на различного рода инфекции (ВИЧ, герпес, гепатит и другие), то берется ПЦР анализ, для чего используется кровь больного.

Чтобы диагностировать герпетическое поражение, мононуклеоз, нужно взять мазок из полости рта больного. Для подтверждения ЦМВИ для осуществления анализа берется моча больного. Возникают случаи, когда обследуют спинномозговую жидкость для выяснения причин возникших неврологических отклонений.

Врач-пульмонолог при этом обследует методом ПЦР мокроту и жидкость из плевры конкретного больного.

Если у новорожденного ребенка возникло подозрение на внутриутробное инфицирование, врачи берут анализ околоплодных вод у беременной женщины и кусочек тканей плаценты.

Сдача анализа: особенности процедуры и расшифровка результатов

Все пациенты, обследуемые по методу ПЦР, получают наиболее достоверный результат. В данном случае возникновение ошибок практически исключено. Результаты данного анализа готовятся достаточно быстро, что облегчает постановку диагноза и обеспечивает своевременное назначение лечебных мероприятий.

Достоверность результата ПЦР напрямую зависит от правильности сдачи материала на обследование. Материал не должен быть загрязнен, иначе результат исследования не будет объективен. К наиболее важным рекомендациям перед сдачей анализа ПЦР относятся следующие требования:

Запрещено проявлять половую активность за сутки до проведения анализа.
Анализ крови на инфекции необходимо сдавать на голодный желудок в утреннее время.
Моча сдается утром в стерильный контейнер.

Результат анализа будет готов через 1,5-2 суток после проведения рассматриваемой процедуры. Встречаются такие ситуации, когда результат может быть подготовлен в тот же день.

Расшифровка результатов

Результат данного вида обследования может быть положительным и отрицательным. Отрицательный результат анализа крови говорит о том, что инфекционных элементов в сданном материале нет. Большое количество проведенных анализов ПЦР показывает отрицательный анализ.

Положительный анализ ПЦР подтверждает тот факт, что в сданном материале обнаружены инфекционные агенты и необходимо качественное, максимально эффективное лечение больного.

Результат может быть положительным, но какие-либо проявления заболевания отсутствуют. Это говорит или о начале заболевания, или о его носительстве. Если выявлено носительство болезни, то никакие лечебные мероприятия не требуются. Просто необходимо наблюдаться у специалиста. Примерами таких заболеваний являются:

папилломавирусная инфекция;
герпес и др.

Обычно их обнаруживают в слюне, соскобе из цервикального канала, уретре. Однако необходимо помнить, что больной человек может заразить абсолютно здоровых, несмотря на то, что его данная болезнь никак не беспокоит. Заболевание может перейти в хроническую форму. Следует отметить, что в тех случаях, когда ПЦР анализ крови показал положительный результат, назначение лечебных мероприятий просто необходимо.

Анализ ПЦР имеет еще и количественную характеристику. Количественный результат оценивает только специалист, он индивидуален для разных инфекций. Основываясь на количественной характеристике, врач способен понять, насколько активен данный патологический процесс, поставить точную стадию развития конкретного заболевания. Благодаря анализированию полученных результатов специалист может выбрать необходимый препарат и, возможно, пересмотреть дозировку препарата.

Точность ПЦР диагностики

Специалистам дают ПЦР 3 важнейших характеристики, среди которых выделяют:

Диагностика инфекций методом ПЦР имеет большую вероятность обнаружения инфекционных агентов. ПЦР анализ крови и других жидкостей высокоспецифичен. С его помощью можно легко выявить конкретный инфекционный процесс. Диагностика ПЦР обладает высокой чувствительностью. Если в исследуемом материале содержится минимальное количество инфекционных агентов, метод ПЦР будет всегда положителен.

Наиболее редко бывает ложноположительный результат. Если инфекции нет, то и результат отрицателен.

ПЦР на скрытый инфекционный процесс

Если у человека подозревают ИППП, то назначают анализ крови на скрытые инфекции. Половые заболевания можно выявить лишь путем обследования больного. Скрыто могут протекать такие заболевания, как:

Вышеперечисленные половые инфекции достаточно распространены и при этом коварны. На начальной стадии развития заболевания они не дают яркой симптоматики, и больные не обращаются за помощью. ПЦР анализ крови, соскобы со слизистой мочеиспускательного и цервикального канала обязательны при подозрении на эти инфекции.

ИППП очень негативно влияют на репродуктивную систему. Они способны вызвать бесплодие или пороки у плода. В связи с этим перед тем, как планировать беременность, нужно сдать анализ ПЦР.

Популярностью пользуется ПЦР на 12 инфекций. Диагностика методом ПЦР 12 проводится благодаря сдаче мазков из половых органов. Забор материала производится через 2 часа после акта мочеиспускания. За 2 дня до исследования нельзя вводить во влагалище суппозитории и проводить спринцевания. Результат анализа будет готов уже через 2 дня.

Стоимость ПЦР колеблется в зависимости от исследуемой инфекции. Цена находится в диапазоне от 200 до 500 рублей за каждую инфекцию. Войти и обследоваться в частной лаборатории можно и самостоятельно, без направления врача.

источник

Исследование крови методом ПЦР

ПЦР – искусственная методика амплификации ДНК.

Способна обнаружить различные воспалительные и инфекционные заболевания на самом раннем сроке развития, до появления первых клинических признаков.

ПЦР представляет собой особый диагностический способ, который делится на несколько этапов:

Денатурация (плавление)
Гибридизация праймеров (отжиг праймеров)
Элонгация

Денатурация

Во время денатурации термоблок нагревают до 94-96 °С, чтобы растворить двойные спиральные цепи водородных связей.

В конце фазы денатурации последовательности ДНК и праймеры должны присутствовать в виде отдельных цепей.

Отжиг праймеров

После денатурации блок охлаждают в течение 30 секунд, это позволяет праймерам связаться с одноцепочечной матрицей.

Дальнейший отжиг проводят при температуре, которая составляет от 55 до 65 ° C.

После того, как была синтезирована новая цепь, температуру снова повышают.

В этом случае до определенной рабочей температуры ДНК-полимеразы (между 68 и 72 ° C), которая теперь начинает амплифицировать ДНК.

Продолжительность этой фазы, в свою очередь, зависит от длины воспроизводимой цепи, обычно длиться от 6 до 11 минут.

На сегодня существует более 10 разновидностей полимеразной реакции.

Однако в лабораторной практике чаще прибегают к качественному определению ПЦР и Real-time PCR.

Как подготовиться к ПЦР крови
ПЦР крови в диагностике гепатита
ПЦР крови на герпетическую инфекцию 1-2 типа
Анализ крови ПЦР методом на туберкулез
Анализ крови на ВИЧ методом ПЦР
Обнаружение Staphylococcus методом ПЦР
Анализ ПЦР на паразитарные инфекции
ИФА или ПЦР: что лучше?

Как подготовиться к ПЦР крови

Подготовка является достаточно важным момент в исследовании любого биологического материала.

Соблюдая простые рекомендации, пациент повышает шансы получения максимального точного результата.

Подготовка к ПЦР и правила сдачи крови, следующие:

Взятие биологического материала — крови, проводится в утреннее время, до 11-12 часов, на пустой желудок.
За час до посещения лаборатории разрешается выпить стакан очищенной воды без газа.
За 5-7 дней необходимо исключить прием медикаментозных средств. В случае невозможности отмены приема лекарства, об этом следует сообщить до взятия крови.
Забор материала для диагностики ПЦР желательно проводить до начала других исследований.

ПЦР крови в диагностике гепатита

В последнее время анализ крови на гепатиты методом полимеразной реакции (ПЦР) все чаще назначается пациентам с подозрением на заболевание.

Анализ крови на гепатит методом ПЦР дает возможность решить такие задачи:

Выявить протекающий инфекционный процесс на раннем сроке развития, в период сероконверсионного окна — до появления в организме антител.
Уточнить отсутствие вирусной патологии, когда другие иммуноферментные анализы предоставили неоднозначные результаты.
Обнаружить вирусоносителя среди серопозитивных пациентов.
Дает возможность точно определить тип гепатита.

Полимеразная реакция определяет ДНК вируса путем исследования образца венозной крови или пунктата печени.

Диагностика может определить гепатит как количественно, так и качественно.

Количественный анализ крови способом ПЦР дает понять врачу о вирусной нагрузке на организм, определяя количество частиц вируса.

Интерпретация (расшифровка) ПЦР крови на гепатит В или С может быть следующей:

Положительный результат

Вируснаходится в стадии обострения или протекает в хронической форме. Выявление «дикого» штамма вируса.
Заражение вирусом гепатита В или С мутантного типа. (HBsAg: отрицательно, анти-HBcor: положительно).
Ложноположительное заключение (анти-HBcor: отрицательно).

Отрицательный результат

На данный момент инфицирование вирусом отсутствует.
Пребывание острой формы вируса в инкубационном периоде.
Период восстановления/выздоровления.

Исследование крови на гепатит методом ПЦР рекомендуется в случае:

Повышения уровня аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартат-аминотрансферазы (АсАТ), выявленного в ходе биохимического анализа крови.
Как часть обследования перед подготовкой к зачатию или хирургическому вмешательству.
Когда пациент регулярно подвергается инъекциям внутривенного характера.
Если у пациента был незащищенный сексуальный контакт, особенно при наличии подозрений о протекающем вирусе у партнера.
Если у пациента присутствуют клинические признаки заболевания.

Анализ крови на гепатит С и другие типы методом ПЦР проводится с использованием метода Real-Time.

Провести диагностику уже можно спустя 14 дней после предполагаемого инфицирования.

ПЦР крови на герпетическую инфекцию 1-2 типа

Основные показания к сдаче ПЦР крови на герпес следующие:

Наличие острой стадии инфекционного процесса, выраженные клинические признаки.
Как часть исследования при подготовке к беременности или экстракорпоральному оплодотворению.
Обнаружение плацентарной недостаточности или признаков герпетического заражения плода.
При наличии у больного острых иммунодефицитных состояний, в том числе ВИЧ, при диагностировании заболеваний, имеющих клетки лимфоидной природы.
В качестве дифференциального исследования инфекций урогенитального тракта.
При появлении высыпаний в виде пузырьков неясной этиологии, без присутствия других клинических признаков заболевания.

Герпес первого и второго типа являются наиболее распространенными формами инфекции.

Оба типа рассматриваются как контагиозные заболевания, способные передаваться от одного человека к другому.

Герпетическая инфекция, вызванная первым типом, проявляется в виде пузырькового высыпания на губах.

Второй тип представляет собой инфекцию генитального характера, где основная локализация высыпаний — внешние половые органы.

В данном случае основной путь передачи — половой контакт, при этом, использование презерватива не дает гарантию защиты.

Расшифровка анализа полимеразной реакции на герпес:

Положительно: в организме имеется инфекция Herpes simplex.
Отрицательно: в организме отсутствует инфекция Herpes simplex.

Следует обратить внимание, что в редких случаях анализ крови методом ПЦР может предоставить ложноположительный результат.

Как правило, подобное случается при прохождении противовирусной терапии, что способствует снижению концентрации вируса в образце крови.

Анализ крови ПЦР методом на туберкулез

Туберкулез (ТБ) — это инфекционное заболевание, вызываемое бактериями из семейства микобактерий, которое насчитывает более 160 различных типов.

Безусловно, самой распространенной причиной туберкулезных инфекций у людей является микобактерия туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis), обнаруженная Робертом Кохом.

Есть также несколько других видов бактерий, которые могут вызвать туберкулез, среди них, M. bovis и М. аfricanum.

Инкубационный период, то есть период до появления признаков туберкулеза после заражения занимает от шести до восьми недель.

Диагностика туберкулеза может быть осложнена из-за отсутствия выраженной клинической картины или присутствия неспецифических симптомов.

Длительный кашель, особенно в сочетании с ночным потоотделением и отхаркиванием, может указывать на туберкулез, особенно при наличии определенных факторов риска.

Прорывов в диагностике Mycobacterium tuberculosis является полимеразная реакция.

Она позволяет определить инфекцию на самой ранней стадии развития, когда патоген только начинает атаковать организм.

Суть методики ПЦР — выделить ДНК Mycobacterium tuberculosis из образца крови пациента, классифицируя микроорганизм.

Кроме того, анализ может выявить стадийность инфекционного процесса, что позволит определиться с терапевтической тактикой.

Анализ крови на туберкулез методом ПЦР не назначается пациенту, который проходит или недавно прошел лечение от данного заболевания.

Данная рекомендация связана с высоким риском получения ложноположительного результата.

Поскольку даже после терапии некоторое количество бактерий остается в организме.

Анализ крови на ВИЧ методом ПЦР

Вирус иммунодефицита человека или сокращенно ВИЧ, является одним из самых известных и угрожающих инфекционных заболеваний с момента его открытия в 1980-х годах.

Несмотря на тот факт, что до сих пор проводятся исследования относительно лечения ВИЧ, не существует пока лекарства или вакцины против данного вируса.

Игнорирование терапии ВИЧ-инфекции неизбежно приводит к СПИДу — синдрому приобретенного иммунодефицита.

За последние 30 лет ВИЧ стал настоящей пандемией, унесшей жизни около 28 миллионов человек.

Поэтому, своевременная диагностика вируса позволит минимизировать риски перехода заболевания в СПИД-стадию, что значительно продлит жизнь пациенту.

Особое значение в исследовании вируса иммунодефицита человека имеет полимеразная реакция — ПЦР.

Особенно диагностика важна в педиатрии, где в принципе невозможно обнаружить раннее течение вируса у детей без применения ПЦР.

Данное явление связано с тем, что ребенок, родившийся от матери с подобной патологией, уже имеет антитела к вирусу.

Полимеразная цепная реакция дает возможность провести дифференциальное исследование ВИЧ-статуса у новорожденного.

При проведении ПЦР в первые два дня и получении положительного результата, будет говорить об инфицировании ребенка еще в утробе матери.

Если результат получен отрицательный, но в течение двух недель после повторного анализа стал положительным — заражение произошло в момент прохождения плода по родовому пути.

Количественный анализ на ВИЧ проводится пациентам в качестве мониторинга терапии.

Диагностика позволяет обнаружить количество копий рибонуклеиновой кислоты, таким образом, определяя эффективность терапевтического воздействия.

На какой день после заражения анализ крови методом ПЦР может обнаружить ВИЧ?

Выявить присутствие в организме вируса можно спустя 5-10 дней после контакта с партнером, имеющим положительный статус ВИЧ.

Отрицательный результат считается достоверным в случае, если он был проведен спустя две недели после контакта с больным.

Однако дополнительно потребуется проведение ИФА.

Обнаружение Staphylococcus методом ПЦР

Staphylococcus aureus (S. aureus) является факультативно-патогенной бактерией высокой клинической значимости.

Может вызывать тяжелые инфекции, такие как сепсис или эндокардит.

Особенно у людей с ослабленным иммунитетом (например, в контексте химиотерапии, при врожденных иммунодефицитах, сахарном диабете).

Кроме того, увеличение заболеваемости мультирезистентными штаммами Staphylococcus aureus (MRSA) затрудняет успешное лечение антибиотиками.

Диагностика MRSA сегодня проводится микробиологическими и референтными лабораториями (учреждения, которые проводят тестирование в конкретной официальной области исследований).

Сегодня все чаще прибегают к использованию полимеразной реакции количественного типа или в реальном времени.

Анализ крови методом ПЦР на стафилококковую инфекцию позволяет быстро обнаружить патоген и определить штамм резистентного Staphylococcus.

В момент лечения или после него, пациенту может быть назначена молекулярная диагностика методом ПЦР Real-time для определения количественной концентрации патогена.

Анализ ПЦР на паразитарные инфекции

Сразу стоит отметить, что анализ крови методом полимеразной реакции (ПЦР) на обнаружение паразитов, эффективен не для всех видов патогенных микроорганизмов.

Наиболее высокая чувствительность метода отмечается при диагностике следующих паразитарных инфекций:

Амебная дизентерия вызвана амебой Entamoeba histolytica.

Инвазивный амебный колит и амебный абсцесс печени.

Не очень распространенные, но потенциально опасные для жизни заболевания среди путешественников в странах с низким уровнем социально-экономического развития.

Амебная дизентерия, также известная как амебиаз, часто протекает бессимптомно, симптомы варьируют от легкой диареи до тяжелой дизентерии.

Основная диагностика заключается в исследовании кала, в частности микроскопия опытной лабораторией, в результате которой можно обнаружить амебные цисты.

В последнее время все чаще прибегают к ПЦР для обнаружения ДНК патогена.

Полимеразная цепная реакция относительно E. histolytica имеет высокую специфичность.

Однако не может определить острое течение паразитарной инфекции от носительства.

Инфекционная болезнь, вызванная паразитом Toxoplasma gondii.

Человек действует как промежуточный хозяин возбудителя; конечным хозяином являются кошки.

При здоровой иммунной системе симптомов обычно нет, только иногда признаки гриппа и опухшие лимфатические узлы. Диагностика — анализ на антитела к токсоплазме, возможно, прямое обнаружение патогенных микроорганизмов при помощи ПЦР.

Получение положительного результата при анализе крови говорит о присутствие в организме острого токсоплазмоза.

Тем не менее, отрицательный результат не дает гарантии, что патогена в организме нет.

Скорее всего, следует тестировать другой биологический материал.

Беременные женщины, которые еще не перенесли токсоплазмозную инфекцию, поэтому не имеют антител к паразиту.

Они должны обратить особое внимание на рекомендуемые профилактические меры.

Трихинеллез является паразитарным заболеванием, вызываемым личинками Trichinella spiralis.

Употребляя в пищу сырое или недостаточно хорошо приготовленное мясо, паразиты могут попасть в организм человека.

Особенно опасна свинина, а также мясо других домашних или диких животных.

Человеческий трихинеллез диагностируется путем обнаружения личинок Trichinella (микроскопия) в биопсии мышц или других биологических материалах.

Часто используется ИФА для обнаружения антител к Trichinella spiralis.

Наиболее современным и часто используемым методом диагностики инфекции является ПЦР.

Метод позволяет обнаружить личинки трихинелл.

Интерпретация результатов исследования простая: «отрицательно» — нет инфекции; «положительно» — заражение имеется.

ИФА или ПЦР: что лучше?

Что собой представляет диагностика крови методом ПЦР, какие отличия от ИФА, и какое исследование выбрать?

Оба вида анализа достаточно широко применяются в лабораторном практике.

Более того, имеют высокую специфичность и точность, которая достигает 98-99%.

Какой именно анализ назначить пациенту, врач решает в индивидуальном порядке.

Нередко может рекомендовать обе диагностика для максимально эффективного мониторинга за состоянием здоровья больного.

Назначение анализа ИФА и ПЦР практически у всех пациентов вызывает множество вопросов.

Поскольку подобный диагностический комплекс кажется одинаковым.

Тем не менее, отличия имеются и вполне существенные.

Так, ИФА позволяет выявить не сам патогенный микроорганизм, а только антитела к нему, которые организм успел выработать.

Тогда как ПЦР определяет непосредственно тип патогена, а также его количество/концентрацию в организме.

Оба анализа являются высокоинформативными и высокоточными методами тестирования инфекционных агентов.

Однако ни ПЦР, ни ИФА нельзя назвать панацеей в исследовании заболеваний вирусной или бактериальной этиологии.

Они являются дополнением к другим лабораторным тестированиям.

Позволяя добиться точного результата при постановке диагноза и определении максимально эффективного лечения.

Для назначения и сдачи анализов крови методом ПЦР обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

ВИЧ
Гарднереллез
Кондиломатоз
Молочница
Сифилис
Трихомониаз
Баланопостит
Герпес
Гонорея
Микоплазмоз
Уреаплазмоз
Уретрит
Хламидиоз
ЗППП

источник