Реактивы для проведения анализов крови

Что такое реактивы для анализа крови

Непосредственным объектом гематологии как науки является система крови, которая состоит из кроветворных органов (костный мозг, селезенка, лимфатические узлы) и периферической крови. Если раньше круг деятельности гематолога ограничивался изучением морфологии клеточного состава периферической крови, костного мозга и лимфатических узлов, то в настоящее время сюда входит и исследование иммунной системы организма.

Кровь представляет собой жидкость сложного состава — плазму, в которой суспензированы форменные элементы: эритроциты (Red Blood Cells, RBCs — красные кровяные клетки), лейкоциты (White Blood Cells, WBCs — белые кровяные клетки) и тромбоциты (Platelets, Pits). При коагуляции крови после отделения сгустка остается жидкость, которая называется сывороткой. В периферической крови в норме содержатся зрелые клеточные элементы. Незрелые предшественники находятся в органе кроветворения — красном костном мозге.

Из методов количественного и качественного исследования форменных элементов крови наиболее распространен общеклинический анализ крови: определение концентрации гемоглобина, цветового показателя, содержания эритроцитов, лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, описание особенностей морфологической картины клеток крови, оценка скорости оседания эритроцитов (СОЭ). При наличии изменений данных показателей дополнительно определяют количество ретикулоцитов и тромбоцитов. Эти исследования проводят всем стационарным больным. В амбулаторных условиях нередко ограничиваются недостаточно информативным определением «тройки»: количества гемоглобина, лейкоцитов и СОЭ. Клинический анализ периферической крови является одним из важнейших лабораторных тестов и иногда дает возможность сразу определить направление диагностического поиска (например, при появлении бластов в формуле крови или наличии гиперлейкоцитоза с абсолютным лимфоцитозом, тельцами Гумпрехта). На основании клинического анализа крови трудно судить о гемопоэзе в целом. Более полное представление дает параллельное изучение костного мозга (цитологическое, цитохимическое и цитогенетическое).

При патологических состояниях гематологические изменения варьируют в зависимости от тяжести процесса, стадии заболевания и наличия осложнений, сопутствующей патологии, проводимой терапии. Необходимо учитывать, что изменения лабораторных показателей (например, количества лейкоцитов и формулы крови) наблюдаются не только при патологических состояниях, но и при проведении некоторых диагностических процедур, изменении физиологического статуса организма (смена климата, время суток, возраст, физические нагрузки, гормональный фон).

Исследование рекомендуется проводить утром натощак или через 1 ч после легкого завтрака. Исследуют, главным образом, капиллярную кровь, можно использовать венозную кровь (также взятую натощак). Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения лекарственных препаратов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после физиотерапевтических процедур. В экстренных случаях этими правилами пренебрегают. Повторные исследования целесообразно производить в одни и те же часы, так как морфологический состав крови подвержен колебаниям на протяжении суток.

Все необходимые исследования, а также приготовление мазков крови следует выполнять как можно скорее. При невозможности быстрого проведения исследований образец крови, тщательно перемешанной с антикоагулянтом, помещают в холодильник при 4 °С. Перед взятием крови из контейнера или пробирки ее осторожно перемешивают неоднократным перевертыванием для исключения возможных погрешностей.

1. 5% раствор цитрата натрия (C₆H₅O₇Na₃· 5H₂O); хранится 1—2 нед, помутневший раствор к употреблению негоден;
2. Трансформирующий раствор (ацетонциангидрин — 0,5 мг; калий железосинеродистый (красная кровяная соль, K₃(Fe(CN)₆) — 0,2 г; натрия гидрокарбонат (NaHCO₃) — 1 г; дистиллированная вода — до 1 л;
3. Изотонический раствор (0,9%) натрия хлорида или реактив Гайема: хлорид ртути II (HgCl₂) — 0,5 г; сульфат натрия (Na₂SO₄) — 5 г; натрия хлорид (NaCl) — 1 г; вода дистиллированная — до 200 мл);
4. 3—5% раствор уксусной кислоты;
5. 14% раствор сульфата магния;
6. 6% раствор ЭДТА;
7. 1% раствор оксалата аммония (NH₄C₂O₄);
8. Спирт этиловый;
9. 3—5% спиртовой раствор йода.

1. копья для прокола пальца (одноразовые);
2. пробирки;
3. пипетки вместимостью 0,02 мл стерильные;
4. капилляры от аппарата Панченкова стерильные;
5. предметные стекла;
6. шлифованные стекла.

Взятие капиллярной крови

Капиллярную кровь получают с помощью прокола: 1) мочки уха; 2) мякоти концевых фаланг пальцев рук; 3) у новорожденных и детей раннего возраста — подошвенной поверхности пятки или большого пальца ноги. Прокол должен быть глубиной около 3—4 мм. Не следует брать кровь из воспаленных или поврежденных участков. Если место предполагаемого прокола холодное или цианотичное, его предварительно согревают массированием или погружением конечности в теплую воду, иначе могут быть получены ошибочные результаты. Кожу обрабатывают 70% этиловым спиртом или специальным антисептическим раствором, дают высохнуть и затем прокалывают. Первую каплю снимают ватным тампоном, выдавливать кровь не рекомендуется. Чтобы получить достаточное количество крови, осуществляют легкий нажим с помощью стерильного тампона.

Для определения числа эритроцитов и лейкоцитов используется пробирочная (безмеланжерная) методика Н. М. Николаева (1954).

Для подсчета числа эритроцитов берут 0,02 мл крови и разводят в пробирке 4 мл 0,9% раствора натрия хлорида (разведение в 200 раз).

Для подсчета количества лейкоцитов также берут 0,02 мл крови и разводят в пробирке 0,4 мл 3-5% раствора уксусной кислоты, подкрашенного несколькими каплями раствора метиленового синего (для окраски ядер лейкоцитов). Тщательно перемешивают. Уксусная кислота гемолизирует эритроциты.

Для определения концентрации гемоглобина в сухую стерильную пипетку набирают 0,02 мл крови и разводят ее в пробирке с трансформирующим раствором (5 мл), перемешивают.

Для определения СОЭ в капилляр от аппарата Панченкова, промытый 5% раствором цитрата натрия, набирают кровь до метки (100 делений) и тщательно выдувают ее в пробирку с подготовленным 5% раствором цитрата натрия (соотношение крови и реактива 4:1), пробирку встряхивают. Время взятия крови записывают.

Для подсчета количества ретикулоцитов можно проводить окраску препарата непосредственно на стекле или в пробирке. Используют унифицированную методику подсчета количества ретикулоцитов. На подготовленное предметное стекло с одним из красителей (бриллиантовый крезиловый синий, азур I или II) наносят каплю крови, готовят тонкий мазок. Для окраски в пробирке в рабочий раствор бриллиантового крезилового синего (5 капель) добавляют 0,04 мл крови, тщательно, но осторожно перемешивают и через 30 мин готовят тонкие мазки.

Количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов можно определять унифицированной методикой Фонио в окрашенных мазках крови. Капилляром Панченкова берут реактив (14% раствор сульфата магния или 6% раствор ЭДТА) до метки «75» и смешивают с кровью, взятой тем же капилляром, до метки «0». Перемешивают, готовят мазки. Фиксируют и окрашивают по Романовскому–Гимзе. Существует также унифицированная методика подсчета тромбоцитов в счетной камере. К 4 мл 1 % раствора оксалата аммония добавляют 0,02 мл крови, перемешивают, оставляют на 25—30 мин для гемолиза эритроцитов.

Для исследования лейкоцитарной формулы, морфологии эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов готовят препараты. Наносят каплю крови на сухое обезжиренное предметное стекло и быстро готовят тонкие мазки с помощью шлифованного стекла.

В настоящее время в связи с появлением гематологических автоматических анализаторов стали шире использовать для общего клинического анализа венозную кровь, которую берут либо в специальные пластиковые пробирки одноразового пользования с порошком ЭДТА, либо в стеклянные пробирки с другим антикоагулянтом. Сразу после взятия крови пробирку закрывают пробкой и несколько раз тщательно перемешивают кровь, не взбалтывая, что позволяет избежать образования сгустков, наличие которых искажает результаты.

Взятие венозной крови

Пациенту объясняют характер предстоящей процедуры. Осматривают его вены, при необходимости используя жгут. Берут шприц емкостью, соответствующей количеству крови, необходимому для анализа. Игла должна быть меньше 22 размера, от 2,5 до 4 см длиной. На плечо накладывают «венозный» жгут. Вместо жгута можно использовать манжету сфигмоманометра под давлением, средним между систолическим и диастолическим у данного пациента. Пациента просят сжать и разжать несколько раз кулак. Тщательно обрабатывают кожу в месте предполагаемого забора (обычно локтевая вена на внутренней поверхности локтевого сгиба) 70 % этиловым спиртом или другим антисептическим раствором и пунктируют вену. Иногда в сосуд сразу попасть не удается, в таком случае прокалывается кожа вблизи вены, а затем пунктируется вена. В тот момент, когда игла попадает в вену, кровь поступает в шприц. Если кровь не получена, иглу подтягивают на себя, и кровь обычно начинает течь в шприц. Жгут ослабляют и просят пациента разжать кулак. После процедуры, легко нажимая кусочком стерильной ваты, вытирают место укола. Прежде чем отпустить пациента, убеждаются, что кровотечение прекратилось. У грудных детей кровь может быть получена из бедренной или наружной яремной вены. Кровь из шприца аккуратно сливают в пробирку или специальный контейнер, предварительно сняв иглу.

В последнее время для забора как венозной, так и капиллярной крови широко используются одноразовые системы, поставляемые на рынок различными фирмами. В частности на российском рынке представлены системы взятия венозной крови Vacuette производства компании Greiner Bioone (Австрия). Всем хорошо известны современные требования к забору крови из вены. Выполняя эти требования, часто приходится сталкиваться с целым рядом сложностей: это и тромбирование крови в игле, и гемолиз, вызванный двукратным прохождением крови через иглу. При необходимости заполнить кровью несколько пробирок увеличивается длительность забора крови. Если планируется определение факторов свертывания, очень важно точно соблюдать соотношение кровь—антикоагулянт, что не всегда удается. Различные неприятности случаются также и при доставке пробирок с кровью в лабораторию: часто приходится сталкиваться с тем, что пробирка разбилась, кровь разлилась или часть крови впиталась в ватный тампон, которым закрыта пробирка. Кроме того, несмотря на то, что персонал работает в перчатках, кровь пациента может попасть на руки.

Эти и многие другие проблемы легко решаются при использовании вакуумных систем для взятия крови Vacuette. Система обеспечивает полную безопасность медицинского персонала при работе в момент взятия крови, так как полностью исключается контакт крови пациента с окружающей средой. Процедура взятия крови занимает всего 30 секунд и безболезненна для пациента. Система обеспечивает максимально точное соблюдение правил преаналитического этапа лабораторных исследований, существенно сокращая вероятность ошибочного результата. Разнообразие компонентов системы позволяет удобно и безопасно взять кровь для любых видов лабораторного анализа. Vacuette® — полностью «закрытая» вакуумная система для взятия крови из вены).

Система Vacuette® аналогична обычному шприцу, но вместо поршня используется перепад давлений, возникающий благодаря тому, что в пробирке создан вакуум. Система максимально удобна в обращении и обеспечивает полную защиту медицинского персонала от возможного заражения.

Кровь, взятая для получения сыворотки или плазмы, центрифугируется непосредственно в пробирке. Возможно также использование пробирок с гелем, который после центрифугирования отделяет сыворотку (плазму) от сгустка, полностью препятствуя обратному смешению.

Осложнения при взятии крови

Ранние осложнения: гематома и коллапс (обморок).

Избежать гематомы можно созданием в месте прокола адекватного давления, наложив тугую повязку.

В случае обморока пациента необходимо уложить на кушетку, дать понюхать раствор нашатырного спирта и вызвать врача.

Поздние локальные осложнения: тромбоз вены, иногда может развиться тромбофлебит.

Поздние общие осложнения: заражение вирусами гепатитов В и С, ВИЧ через инфицированную иглу или шприц.

Профилактика осложнений:

• если кровотечение из места прокола трудно остановить, этому участку тела придают возвышенное положение и накладывают давящую повязку. Пациента наблюдают до тех пор, пока кровотечение не прекратится;
• кровь для любых лабораторных исследований не рекомендуется брать из той конечности, в которую переливают кровь;
• у больных лейкозами, агранулоцитозом и пациентов с пониженной сопротивляемостью организма (иммунодефициты) прокол пальца или мочки уха может вызвать инфекцию скорее, чем венепункция. Если для исследования все же требуется капиллярная кровь, кожу необходимо особенно тщательно обрабатывать дезинфицирующим агентом. Этиловый спирт не является средством выбора, лучше использовать специальные антисептические растворы.

Управление милиции МВД Белорусской ССР

Поступила в редакцию 30/XI 1959 г.

библиографическое описание:
Новый реактив для установления наличия крови при помощи микроспектрального анализа / Капелиович Р.Н. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1961. — №3. — С. 32-33.

Для установления наличия крови на вещественных доказательствах путем микроспектрального анализа прежде всего прибегают к получению спектра гемохромогена.

Обычно применяемые при этом реактивы имеют ряд отрицательных качеств (летучесть, неприятный запах, относительно быстрая утрата активности и пр.).

В связи с указанным мы попытались составить реактив, который, будучи лишен упомянутых недостатков, не снижал бы чувствительности пробы, являлся доступным и безвредным, а также устойчивым в процессе хранения.

Такой реактив был изготовлен по следующей прописи: серы очищенной или осажденной 1 г, 10% раствора едкого натра 10 мл.

Смесь кипятят до появления интенсивного желтого или оранжевого- цвета и фильтруют в горячем виде. Реактив сохраняет свою активность в течение 5—6 ме сяцев.

В дальнейшем в его состав было введено 10 мл 96° спирта, что- ускорило и улучшило растворимость серы и удлинило срок годности реактива до 7 месяцев и более.

В данном случае смесь серы, раствора едкого натра и спирта кипятят 2—3 минуты до появления темно-янтарного цвета. Фильтрование необязательно, так как раствор является прозрачным.

При кипячении раствора едкого натра с серой образуются растворимые в Еоде сульфиды натрия, обладающие восстанавливающим действием; в присутствии их щелочь переводит гемоглобин в гемохромоген.

Оба реактива не требуют времени для созревания, хорошо сохраняются в обычных склянках. В горячем состоянии они издают слабы» запах сернистых соединений. От остывших реактивов запах не ощущается, что свидетельствует об отсутствии летучести и, следовательно, о меньшей вредности для исследующего.

Действие реактивов испытывали путем исследования минимальных количеств крови, высушенной в виде корочек и пятен на всевозможных текстильных тканях, металлических предметах и штукатурке; опыты производили как со свежей кровью, так и с кровью давностью до 59 лет, а также с кровью, подвергавшейся гниению, замыванию водой и щелочами, влиянию температуры 120° в течение 1—2 часов. Исследовали кровь на различных вещественных доказательствах в 70 экспертизах, причем параллельно применяли реактив Такаяма, едкую щелочь и многосернистый аммоний и реактив Виды (2,5 г едкого кали, 7,5 мл дистиллированной воды, 1 г гидросульфита натрия). Кусочек материала из пятна или соскоб помещали на предметное стекло, добавляли 1—2 капли реактива и накрывали покровным стеклом. Микроспектральный анализ проводили с насадкой АУ-16 и спектроскопом прямого зрения, надетым на тубус микроскопа.

Под действием обоих реактивов кровь приобретает такой же розово-красный цвет, как и при других восстановителях.

Чувствительность пробы весьма велика. В препаратах, находящихся во влажных камерах, спектр гемохромогена сохраняется до 7 суток и более. Давность крови не оказывает заметного влияния на результаты исследования. Кровь хорошо и быстро растворяется, спектр гемохромогена получается весьма отчетливо. Гнилостно измененная и подвергшаяся воздействию высокой температуры кровь растворяется несколько медленнее, чем относительно свежая. Красители тканей обычно не препятствуют наблюдению спектра гемохромогена. Во многих случаях кровь растворяется быстрее, чем краситель, особенно при употреблении реактива со спиртом; поэтому поступающий в раствор краситель не мешает микроспектральному анализу.

1. Предлагаемые реактивы, состоящие из раствора едкого натра и серы или из раствора едкого натра, серы и спирта, обеспечивая высокую чувствительность пробы на гемохромоген, позволяют доказывать наличие минимальных количеств крови в следах на вещественных доказательствах.
2. Эти реактивы лучше и быстрее растворяют кровь, чем щелочь и многосернистый аммоний, реактивы Такаяма и Виды; они являются более устойчивыми и способствуют длительному сохранению спектра гемохромогена в препаратах. Они менее вредны или совсем безвредны; для исследующего.

Судебно-медицинская оценка механизма образования брызг крови / Левкович О.Б., Гусаков Ю.А., Гедыгушев И.А. // Матер. IV Всеросс. съезда судебных медиков: тезисы докладов. — Владимир, 1996. — №1. — С. 151-153.

Особенность следов крови при выстрелах в смоченную кровью мишень / Степанов С.А. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2018. — №17. — С. 203-208.

Современный этап изучения следов крови на кафедре судебной медицины Сеченовского университета / Леонова Е.Н., Нагорнов М.Н., Ломакин Ю.В., Прохоренко А.С. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2018. — №17. — С. 145-149.

Анализ крови на биохимию — самый часто назначаемый анализ в гинекологии, урологии, эндокринологии, онкологии, дерматологии и хирургии. Если правильно расшифровать полученные сведения, то можно быстро диагностировать заболевания и нарушения обмена веществ, даже в тех случаях, когда они не дают четких симптомов. Не зря врачи называют биохимический анализ крови — «сывороткой правды».

Чтобы результаты анализа действительно оказались полезными, перед походом в лабораторию рекомендуем ознакомится с этой статьей.

Биохимическое исследование крови – важнейшее диагностическое мероприятие, которое дает возможность получить точную оценку липидного, белкового и углеводного обмена. Эти показатели важны при огромном числе патологий и заболеваний, в связи с чем биохимию крови считают одним из базовых тестов лабораторной диагностики.

биохимический анализ крови в спб

Оценка содержания биохимических веществ производится по их концентрации, которая сравнивается с показателями нормы. В случае отклонения концентрации того или иного фактора от нормы делают выводы о вероятности определенного заболевания.

Биохимический анализ крови, как и любой другой, предполагает несложную подготовку. К этим мероприятиям нужно отнестись очень внимательно, так как любое нарушение повлияет на свойства и состав крови. Условия точных результатов:

• Ужинайте накануне сдачи крови нежирной пищей, не пейте кофе и крепкий чай. Непосредственно перед сдачей крови утром ничего не есть, пить можно только воду.
• За сутки до назначенной даты воздержитесь от посещения бани или сауны и не переутомляйтесь.
• Сдавайте кровь на биохимию перед другими процедурами, если таковые были назначены (рентген, уколы, капельницы, массаж).
• Чтобы уровень сахара был определен наиболее точно, не пейте кофе с утра и даже не чистите зубы.
• Если вы принимаете препараты, снижающие концентрацию липидов (жиров), следует по возможности завершить их прием недели за две до анализа.
• Ограничьте на время применение гормонов, антибиотиков, мочегонных средств и др. препаратов. На какой срок и какие таблетки нужно будет отложить, скажет врач, направляющий на процедуру.

Если назначено повторное обследование, проходите его в той же самой лаборатории и примерно в такое же время. Каждая лаборатория использует свои методики и реактивы, поэтому результаты в разных лабораториях будут различаться.

Диагностическими маркерами биохимического анализа крови выступают следующие показатели:

• Глюкоза в крови . Важнейший тест, демонстрирующий функциональность и нормальность работы эндокринной системы, печени и поджелудочной железы. Данный показатель выступает главным диагностическим параметром при выявлении сахарного диабета.
• Билирубин общий . Данное вещество представляет собой пигмент, который образуется в результате разрушения гемоглобина. Происходит это при активном разрушении эритроцитов, при нарушении работы печени (желтуха, цирроз), а также в результате нарушений оттока желчи.
• Билирубин прямой и непрямой. Этот показатель представляет собой отдельную фракцию общего уровня билирубина и повышается при нарушениях желчного оттока, что характерно в первую очередь для желтухи. Разница между значениями общего билирубина и фракции прямого билирубина, называется непрямым показателем.
• АсАТ (АСТ) и АлАТ (АЛТ) – данные показатели выступают ферментами, основным местом выработки которых являются клетки печени. Именно поэтому повышение концентрации данных веществ в крови может свидетельствовать о деструктивных процессах печени, сердца и других внутренних органов.
• Гамма-ГТ (гамма-глутамилтрансфераза) – фермент повышенная концентрация которого свидетельствует о патологии печени или поджелудочной железы.
  Фосфатаза щелочная – еще один ферментативный фактор, в норме выявляемый в крови в незначительных количествах. Повышение уровня щелочной фосфатазы говорит о заболеваниях печени и костных структур.
• Общий холестерин – важный показатель, демонстрирующий работу печени и характер питания пациента, так как данное вещество поступает в организм вместе с пищей.
  Липопротеины низкой плотности (ЛПНП) – важнейшая характеристика, которая может заблаговременно сигнализировать о высоком риске образования атеросклеротических бляшек в сосудах.
• Триглицериды – одна из основных характеристик обмена жиров в организме.
• Общий белок – демонстрирует общий уровень белковых компонентов в крови, и позволяет выявить нарушения в работе печени и наличие инфекционно-воспалительного процесса.

Также биохимический анализ крови учитывает уровень альбумина, калия, натрия, хлора, железа, креатинина, мочевой кислоты, мочевины и С-реактивного белка.

1. Правильная подготовка к сдаче анализов крови
2. Сдача крови на анализ
3. Самостоятельное проведение экспресс-теста
4. Виды анализа на холестерин
5. Расшифровка результатов анализа
6. Что лучше есть перед сдачей крови на анализ

Для снижения холестерина наши читатели успешно используют Aterol. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Чтобы диагностировать атеросклероз и вовремя выявить риск развития инсультов и инфарктов, необходимо сделать анализ на холестерин. Для этого кровь отбирается из вены, причем делается это натощак.

Далее рассмотрим, как специалисты рекомендуют готовиться к сдаче анализов, как правильно сдавать кровь, какие анализы будут проводиться, а также о чем будут говорить их результаты.

Обычно вся подготовка перед тем, как сдавать кровь на холестерин, заключается в воздерживании от принятия пищи в течении минимум восьми часов.

Обычно полным людям врачи рекомендуют не употреблять за два дня до анализов любую жирную пищу. Это способствует более качественной подготовке.

Существуют утвержденные правила, которые по пунктам расписывают, как подготовиться к сдаче крови на холестерин:

• Прием пищи проводится за 12-16 часов перед посещением медицинского учреждения. Более длительное голодание может привести к ослаблению организма, вследствие чего результаты лабораторного теста окажутся недостоверными.
• Минимум сутки перед проведением исследования нельзя употреблять алкоголь, а за 1,5-2 часа также не рекомендуется курить.
• Перед сдачей крови можно пить только негазированную воду без сахара, хотя и это также нежелательно. По возможности ограничьтесь стаканом очищенной воды.
• Если употребляются медицинские препараты, об этом обязательно предупреждается врач, дающий направление на проведение исследования. В этом случае отменяется прием лекарственных средств, влияющих на содержание холестерина (витамины, мочегонные средства, антибиотики, гормональные препараты и другие).
• Уровень холестерина у женщин репродуктивного возраста находится вне зависимости от менструального цикла, поэтому от специализированного исследования не следует отказываться даже в ходе месячных.

Иногда, напротив, специалисты требуют от пациентов вообще специально не готовиться к сдаче крови. Это нужно, если будет проводиться определение среднего показателя.

Только в специализированных лабораториях медицинских учреждений может быть проведен анализ на холестерин. Как сдавать кровь, непосредственно на месте объяснит сотрудник лаборатории, а от самого пациента лишь требуется правильно подготовиться к процедуре и прийти утром в медучреждение.

Непосредственно перед сдачей рекомендуется минут 10-15 посидеть и расслабиться. Сразу после быстрой ходьбы или, например, подъема на несколько этажей по лестнице процедуру начинать нельзя.

С высокой точностью самостоятельно анализ крови на холестерин провести не удастся, так как универсальных приборов для этого еще не существует. Такой процесс проводится исключительно в специализированной лаборатории по специальным схемам с использованием высокочувствительных реактивов.

Тем не менее для пациентов, которым показана гиполипидемическая терапия, существует специальный экспресс-метод диагностики при помощи электронного экспресс-анализатора с тестовыми одноразовыми полосками или же экспресс-теста, тоже одноразового.

С их помощью можно получить представление об эффективности лечения дома, не посещая врача.

Для проведения экспресс-теста следует обязательно проводить все подготовительные мероприятия, связанные с ограничением приема пищи, алкоголя и т. д.

Удобство метода заключается не только в отсутствии необходимости посещения лаборатории, но и в быстрых результатах диагностики — сделать вывод о примерном содержании холестерина можно уже через пять минут, в то время, как заключение медицинским учреждением выдается только через 1-3 суток.

Приборы для экспресс-тестов используются по типу глюкометра:

1. На специальную тест-полоску в аппарате помещается капля крови пациента;
2. Через примерно три минуты на дисплее появится цифра, которая и будет результатом анализа общего содержания холестерина в крови.

Подобные исследования крови у здоровых людей проводятся обычно раз в год. Пациентам же с повышенным фактором риска развития сердечно-сосудистых заболеваний проверку следует проводить чаще, в т. ч. с использованием описанного портативного прибора.

Всегда для оценки состояния здоровья в ходе диспансеризации, медобследований и т. д. проводится общий анализ крови, холестерин при котором определяется наряду с другими важнейшими показателями.

Если выявляется его превышение (более 5,2 ммоль/л), то это служит основанием для проведения более развернутого исследования, называемого липидограммой.

Наиболее точно об опасности развития атеросклероза можно судить, проведя т. н. развернутый анализ крови на холестерин. Он представляет собой расширенное исследование (липидограмму), которая определяет не только содержание общего холестерина, но и его фракций, триглицеридов и коэффициента атерогенности.

Холестерин, а точнее его фракции в результатах развернутого анализа обозначаются как:

• ЛПВП или альфа-холестерин (липопротеид с высокой плотностью). Он представляет собой «полезный» вид холестерина, который не откладывается в сосудах, а напрямую транспортируется в печень. Нормальные показатели ЛПВП должны превышать 1 ммоль/л.
• ЛПНП или бета-холестерин (липопротеид с низкой плотностью). Это уже т. н. вредный холестерин, служащий строительным материалом для атеросклеротических бляшек в сосудах. Его содержание в крови должно быть менее 3 ммоль/л.

Еще один важный показатель в результатах исследований — индекс атерогенности, обозначаемый аббревиатурой КА. Он представляет собой соотношение ЛПНП/ЛПВП.

Если значение рассматриваемого коэффициента меньше трех, то человек здоров, а риск поражения сосудов у него минимальный. О имеющемся уже атеросклерозе будет свидетельствовать превышающее 5 единиц значение КА. В этом случае высока вероятность развития ишемического поражения внутренних органов, включая ИБС.

Еще раз отметим, что именно от питания перед проведением исследования во многом будут зависеть его результаты.

Поэтому обязательно нужно знать, как сдать анализ на холестерин правильно, в противном случае вслед за обычным общим анализом необходимо будет провести развернутый, а также и другие исследования, так как превышение или, напротив, недостаточное количество рассматриваемого органического соединения обычно свидетельствует о развитии различных патологий.

Повышенный холестерин встречается у пациентов с ишемической болезнью сердца, а также при сахарном диабете, болезнях почек, ожирении, раке поджелудочной железы, алкоголизме.

Но и низкая концентрация также не является нормой и может говорить о наличии таких заболеваний, как запущенный цирроз, хроническая анемия, а также болезнях костного мозга, имеющихся раковых образованиях и т. п.

Ранее приведенное значение допустимого уровня холестерина на уровне 5 ммоль/л является усредненным, т. к. данный показатель зависит от возраста и более детально определяется по специальной шкале SCORE:

• Лицам, входящим в низкую группу сердечно-сосудистого риска (без плохой наследственности, молодого возраста) допустимый уровень лежит ниже отметки 5,5 ммоль/л.
• Для пациентов с умеренным риском (страдающих ожирением, с низкой физической активностью, среднего возраста) допустимым уровнем является 5 ммоль/л.
• Для лиц из высокой группы риска (гипертоников, с сахарным диабетом, сосудистой патологией) значение должно быть ниже 4,5 ммоль/л.
• Для людей с очень высоким сердечно-сосудистым риском (инсульт, ИБС, атеросклероз) нормальным уровнем холестерина будет считаться концентрация менее 4-х ммоль/л.

Также нужно учитывать, что нормальные результаты анализов различаются, например, у детей разного возраста и у взрослых, поэтому точно определить необходимость проведения дополнительных исследований и назначить соответствующее лечение может только врач.

Если общий анализ выявил превышение содержания холестерина в крови, необходимо проводить развернутое исследование. Как правильно сдать кровь на холестерин, ранее уже было отмечено.

В данном случае перед проведением развернутого анализа важно как можно более тщательно следовать приведенным рекомендациям, так как на его основе в случае выявления патологии будет назначаться соответствующее лечение.

Такой важнейший показатель, как уровень «плохого» холестерина ЛПНП определяет возможность развития сосудистых патологий. Поэтому на основании его значений с учетом степени сердечно-сосудистого риска врачом назначается (или, напротив, не назначается) лечение с использованием статинов.

Эти препараты, несмотря на эффективность в борьбе с повышенным холестерином, имеют массу противопоказаний, вот почему крайне важно качественно сдать анализ на холестерин. Как сдавать кровь на общее исследование, ранее было подробно описано. Порядок подготовки к сдаче на развернутый анализ ничем не отличается.

Более подробно рассмотрим расшифровку развернутого исследования крови. Помимо определения ранее рассмотренных ЛПВП и ЛПНП («полезного» HDL-холестерина и «вредного» LDL-холестерина) определяется также и уровень триглицеридов.

Последние являются производными жирных кислот и глицерина, т. е. поступающими из пищи в кровь растворенными жирами и не относятся к соединениям холестерина.

Ниже подробно представим нормальные, повышенные и высокие значения концентраций рассмотренных соединений:

Особое внимание следует обратить на «хороший» холестерин. Его уровень в отличие от «плохого» ЛПНП определяется максимальным показателем, т. е. чем больше его в организме, тем более защищенными от различных патологий являются ваши сосуды.

Итак, вам требуется сдать кровь на холестерин. Как подготовиться к этому мероприятию, уже было описано. То есть нельзя есть как минимум за 12 часов до сдачи, употреблять алкоголь за сутки и т. д.

Однако если до сдачи анализов есть несколько дней, можно подготовиться получше, выбрав диету, которая поможет максимально подготовить ваш организм.

Для этого полностью исключите из рациона всю жирную, копченую, жареную пищу, выпечки, шоколад и любые сладости, жирные молочные продукты. Старайтесь по возможности употреблять большее количество морепродуктов и овощей.

Больше находитесь на воздухе, совершайте пешие прогулки, увеличьте физическую активность. В этом случае при отсутствии серьезных заболеваний ваш холестерин в крови всегда будет в норме.

Ревмопробы – биохимическое исследование, подразумевающее не один анализ, а целый набор лабораторных тестов, используемых для диагностики аутоиммунных состояний организма.

Отправляя пациента на «ревмопробы», врач, как правило, составляет перечень показателей, интересующих его (что зависит от того, какую патологию подозревает доктор). Это может быть С-реактивный белок (СРБ, СРП, CRP), ревматоидный фактор (РФ), антистрептолизин-О (АСЛ-О, ASO), общий белок, белковые фракции, креатинин и др. Причем, определения «положительные ревмопробы» или «отрицательные результаты» применимы только в отношении СРБ, РФ и АСЛ-О (качественный анализ). Что касается других биохимических показателей (общий протеин, белковые фракции, мочевина, креатинин), то их содержание должно иметь цифровое выражение.

Для снижения холестерина наши читатели успешно используют Aterol. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Обычно ревмопробы назначают после перенесенной бактериальной или вирусной инфекции, коль есть подозрение, что она могла запустить аутоиммунный процесс, или в случае появления признаков развития хронической воспалительной реакции, обусловленной другими причинами. Итак, поводом сдать анализ крови и сделать ревмопробы можно считать:

• Иммунновоспалительные болезни почек (гломерулонефрит);
• Частые ангины (диагноз: хронический тонзиллит);
• Онкологическая патология различной локализации;
• Аутоиммунные заболевания (СКВ – системная красная волчанка, РА — ревматоидный артрит).

В подобных случаях анализ крови (ревмопробы) показывает, насколько далеко зашел аутоиммунный процесс, какие изменения в организме он вызвал, как организм откликнулся (или откликается) на проведенные лечебные мероприятия. Отвечая на поставленные вопросы, данное лабораторное исследование помогает врачу правильно оценить степень прогрессирования болезни и состояние пациента, а также дает возможность прогнозировать исход заболевания и эффективность назначенной терапии.

Как указывалось выше, ревмопробы могут включать различные лабораторные показатели:

• С-реактивный протеин (СРБ, СРП, CRP);
• Ревматоидный фактор (РФ);
• Антистрептолизин О (АСЛ-О, ASO);
• Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (А-ЦЦП, А-ССР, anti-CCP);
• Общий белок с разделением его на фракции (α, β, γ);
• Мочевую кислоту (МК), креатинин, мочевину, креатин;
• Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК);
• В иных случаях в перечень ревмопроб могут быть добавлены сиаловые кислоты (сиалогликопротеины), занимающие краевое положение в углеводно-белковых комплексах и имеющие склонность к повышению в случае компенсаторных воспалительных реакций, а также серомукоиды (фракция углеводно-белковых комплексов, в состав которых входят протеины «острой фазы), заметно отклоняющиеся от нормы при любых воспалительных процессах.

Отдельные биохимические показатели не всегда присутствуют в списке лабораторного исследования под названием «ревмопробы». Например, общий протеин и белковые фракции интересны, если у пациента предполагаются (или диагностированы) гематологические заболевания, в том числе, злокачественные, миелома, аутоиммунные процессы, тяжелые поражения печени. Тест на мочевую кислоту проводится тогда, когда наличествуют симптомы подагры. А креатин, креатинин и мочевина подтвердят подозрения в отношении развития почечной патологии (или, наоборот, исключат заболевания почек).

Не всегда проводят определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) — показателей формирования воспалительных реакций и активности аутоиммунных процессов, протекающих в организме (ревматизм, коллагенозы, гломерулонефрит, последствия вирусных и бактериальных инфекций). Это связано с некоторыми трудностями: выявление ЦИК не относится к традиционным биохимическим исследованиям, анализ подобного рода находится в компетенции иммунологических лабораторий, которые обеспечены тест-наборами для производства таких анализов и занимаются подобной деятельностью ежедневно. Разумеется, это преимущество имеют клинико-диагностические лаборатории, расположенные в многопрофильных клиниках больших городов.

Нет смысла давать подробную характеристику всем биохимическим показателям, входящим в состав ревмопроб (они перечислены выше), если на нашем сайте их значимость, расшифровка и особенности уже представлены вниманию читателей в соответствующих разделах. Между тем, нельзя еще раз коротко не упомянуть о тех трех факторах, которые признаны главными — СРБ, РФ, АСЛ-О. Правда, в последнее время отдельные лаборатории для диагностики ревматоидного артрита стали использовать четвертый показатель – антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (А-ССР), об основных достоинствах которого читатель также сможет узнать в данной статье. При всем этом, следует заметить, что каждый из тестов, хоть и хорош по-своему, но может не давать полной картины происходящего, поэтому врачи не назначают их по отдельности (только СРБ или только АСЛО…). Как правило, они (с расшифровкой каждого) идут все вместе под одним названием – ревмопробы, поскольку совместно они помогут не только установить диагноз ревматоидного артрита, но и позволят дифференцировать его (РА) от другой, схожей по клинике, патологии.

Расшифровка данных тестов проста, однако по каждой позиции отдельна, например: РФ (СРБ, АSO) – отрицательно. В случае положительной реакции, нужна отметка о проведении полуколичественного, количественного анализа или титровании с результатом исследования либо о необходимости привлечения дополнительных методов, если сама лаборатория по каким-либо причинам не может их обеспечить. При наличии указания на количественное содержание показателя, чтобы не запутаться в нормах, которые в разных лабораториях могут отличаться, следует узнать референсные значения, принятые в КДЛ, производившей анализ.

Расшифровка других биохимических показателей, которые могут войти в исследование под названием «ревмопробы», приведена в соответствующих темах, размещенных на других страницах сайта.

С-реактивный белок – острофазный протеин в биохимическом анализе крови проявляющийся увеличением фракции гамма-глобулинов, к которым он и относится. Норма в крови — до 5 мг/л .Повышение СРБ, в первую очередь, провоцирует острый воспалительный процесс (в таких случаях данный показатель может увеличивать свои значения в 100 и более раз).

Методика определения СРБ (латексная агглютинация) сложностью не отличается и позволяет получить ответ в самое ближайшее время. Если результаты качественного латекс-теста отрицательные, значит, можно сделать вывод, что с С-реактивным протеином все в порядке. Если же при проведении анализа отмечается положительная ревмопроба, то в тест-наборе имеются реактивы, обеспечивающие дальнейшее проведение исследования (полуколичественный анализ).

СРБ для диагностики острого воспаления имеет особую ценность, ведь этот белок реагирует практически немедленно и повышается раньше других показателей (СОЭ, лейкоциты). Кстати, и в норму он приходит раньше других: процесс затих – результаты отрицательные.

Уже по названию видно, что ревматоидный фактор имеет непосредственное отношение к ревмопробам и определенной патологии – ревматоидному артриту (РА). И в самом деле, ревматоидный фактор (РФ) – главный анализ, выявляющий эту болезнь. Кроме этого, данный лабораторный показатель не лишен способностей «заметить» другие патологические состояния: острый воспалительный процесс любой локализации, системные заболевания. Норма РФ в большинстве лабораторий фиксируется как «отрицательный результат», либо не более 14 МЕ/мл.

Сам по себе РФ представляет совокупность антител (M, A, E, G), где наибольшую часть занимают иммуноглобулины класса М (IgM). Иммуноглобулины М, подвергаясь воздействию инфекционного агента, начинают изменять свои обычные свойства и брать на себя роль аутоантигенов, чем «вводят в заблуждение» собственные иммуноглобулины класса G. Метаморфозы, происходящие с IgM в определенных условиях, легли в основу данного исследования.

РФ, подобно СРБ, можно определить с помощью латекс-теста. Это качественный анализ, который нередко дает ложноположительные ответы, поэтому больше подходит для скрининга, нежели для окончательного установления диагноза. Норма качественного анализа на РФ – отрицательный результат. Однако следует иметь в виду и то, что существует серонегативная форма заболевания (РА), когда результаты отрицательные, а симптомы не оставляют сомнений в развитии воспалительной реакции подобного рода.

При положительной ревмопробе (имеется в виду – РФ) или при подозрении на серонегативную форму заболевания, следует обратиться к другим лабораторным тестам, например, ИФА (иммуноферментный анализ), который позволяет определить не только количественное содержание иммуноглобулинов М в плазме, но и найдет другие антитела, присутствующие в ревматоидном факторе.

Антистептолизины-О представляют собой антитела (АТ), направленные к стрептолизину (так называют антиген бета-гемолитического стрептококка). Норма для взрослых — до 200 Ед/л; для детей до 14 лет — до 150 Ед/л.

Учитывая особую «вредность» гемолитического стрептококка (вторичные инфекции, всевозможные осложнения), тест, определяющий его присутствие в организме, считается весьма значимым лабораторным показателем. Его применяют не только для диагностики патологических состояний, вызванных Streptococcus pyogenes, но и с целью мониторинга развития воспалительного процесса, его прогноза и эффективности лечения. Между тем, следует заметить, что однократное исследование может не дать должной информации, то есть, отрицательные результаты за первым разом не способны успокоить ни врача, ни больного (у 15% пациентов-ревматиков повышение титров АТ может фиксироваться через раз или вовсе не обнаруживаться).

Для определения антистрептолизинов-О и его титров (в набор входит отдельный комплект для титрования) также существует латекс-тест – исследование быстрое и нетрудоемкое, однако некоторые врачи предпочитают проведение анализа крови турбидиметрическим методом, к нему у них больше доверия. Но этот метод (турбидиметрический) уже нуждается в привлечении более сложного оборудования.

Тест на выявление anti-CCP вошел в лабораторную практику, можно сказать, недавно, ведь сами антитела были описаны только в 1998 году. Однако высокая чувствительность и специфичность для РА позволила новому исследованию быстро занять место лучшего маркера ревматоидного артрита. Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду взяли на себя ключевую роль в развитии данного патологического состояния. Кроме этого, определение anti-CCP хорошо себя зарекомендовало в вопросах проведения дифференциальной диагностики, прогнозирования течения процесса, разработки стратегии терапевтического воздействия.

Исследование А-ССР проводится с помощью передового иммунохимического метода с электрохемилюминисцентной детекцией (ECLIA). К сожалению, пока не каждая лаборатория может гордиться внедрением новой технологии. Анализ требует участия дорогостоящего оборудования и специальных тест-систем, закупаемых за рубежом, что иным медицинским учреждениям оказывается не по карману.

Норма anti-CCP — «отрицательный результат», до 20 Ед/л.

Шаг 2: после оплаты задайте свой вопрос в форму ниже ↓ Шаг 3: Вы можете дополнительно отблагодарить специалиста еще одним платежом на произвольную сумму ↑

Цоликлоны – это моноклинальные антитела, полученные путем генной инженерии из крови стерильных мышей и применяемые для определения группы крови системы АВО. В отличие от стандартных сывороток, цоликлоны отличаются очень высокой активностью и авидностью, то есть временем наступления и выраженностью реакции агглютинации (склеивания). Основными цоликлонами являются: анти-A, анти-B, анти-AB, анти-0 и другие. По ним определяют группы крови и резус-фактор.

Определение группы крови данным методом проводится в лаборатории. Температура воздуха в помещении должна составлять от +15 до + 25 градусов C. Исследование должно проходить при хорошем освещении. Все реагенты нужно хранить плотно закрытыми, поскольку при высыхании активность антител значительно снижается. Нельзя использовать мутные и содержащие хлопья реагенты. Для каждого из них нужна отдельная пипетка. Процедура проводится на планшете или тарелке белого цвета, поверхность которых должна хорошо смачиваться. Благодаря высокой авидности и активности цоликлонов, есть возможность применения по одной серии анти-A и анти-B реагентов.

На планшете делают надписи: анти-A и анти-B. Под соответствующие надписи капают цоликлоны в количестве примерно 0,1 мл. Реагент анти-A имеет желтовато-розовый цвет, анти-B – синий. Рядом с моноклональными антителами капают по капле крови и смешивают ее с реагентами стеклянной палочкой или уголком предметного стекла. Перед смешиванием следующей пары капель палочку или стекло тщательно промывают и вытирают насухо.

На протяжении 2,5 минут ведут наблюдение за агглютинацией, при этом планшет слегка покачивают. Затем оценивают результат. Надо сказать, что для наблюдения за процессом не требуются никакие приспособления. Агглютинаты хорошо видны невооруженным глазом, они быстро сливаются и образуют большие хлопья. Если склеивания не происходит, капля реагента равномерно окрашивается в красный цвет.

1. Если агглютинация отсутствует (и с цоликлоном анти-A, и с анти-B), в эритроцитах нет ни антигена A, ни B. Это I группа.
2. Если агглютинация есть лишь с цоликлоном анти-A, в эритроцитах содержится только антиген A. Это кровь II группы.
3. Если агглютинация наблюдается лишь с цоликлоном анти-B, в красных клетках есть только антиген B. Это III группа.
4. Если агглютинация произошла c цоликлоном и анти-A, и анти-B, в эритроцитах есть оба антигена. Для исключения аутоагглютинации проводят контрольную процедуру: смешивают изотонический раствор натрия хлорида (0,1 мл) и исследуемую кровь (0,01 мл). Если агглютинация отсутствует, то это IV группа.

На планшет наносят большую каплю реагента анти-D-супер. Рядом – маленькую (в 10 раз меньше) исследуемой крови, которую смешивают с реагентом и оценивают результат. Если началась агглютинация, кровь является резус-положительной, при отрицательном резус-факторе агглютинации не происходит.

Моноклональные реагенты для определения группы крови имеют явные преимущества по сравнению со стандартными изогем-агглютинирующими сыворотками. Они обеспечивают очень точный результат, а сама процедура безболезненна, безопасна и занимает очень мало времени.

Почему лопаются сосуды в глазах?

Овладение студентами методикой общего клинического анализа крови и клинической оценкой полученных данных.

Морфологическое исследование крови состоит из:

— определения количества гемоглобина,

— определения количества эритроцитов и

— подсчета лейкоцитарной формулы,

— цветового показателя, а также

— определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ).

Реже присоединяют подсчет ретикулоцитов, тромбоцитов.

Для морфологического исследования достаточно того количества крови, которое можно получить из укола в палец.

Исследования крови следует всегда производить в одно тоже время при одинаковых условиях, до приема пищи. Кровь берут из IV пальца левой руки. Перед уколом палец дезинфицируют и обезжиривают, протирая его ватой, смоченной спиртом, а затем

эфиром или их смесью. Прокол производят либо стерилизованным скарификатором, либо иглой Франка со сменными стерилизуемыми лезвиями. Укол обычно производится в верхушку мякоти первой фаланги на глубину 2,5 — 3 мм. Полученную после укола первую каплю снимают фильтровальной бумагой или ватой, смоченной эфиром. Кровь для исследования берут в определенном порядке: для

определения СОЭ, гемоглобина, затем — для подсчета лейкоцитов и эритроцитов; делают мазки. После взятия крови, мякоть пальца оборачивается смоченной эфиром или спиртом ватой и прижимается к ладони для того, чтобы остановить кровотечение.

Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)

3. 5% раствор лимоннокислого натрия (свежеприготовленный) .

5. Игла Франка или скарификатор.

Аппарат Панченкова состоит из штатива с капиллярами (12 шт.) шириной 1 мм, на стенке которых нанесены деления от 0 (сверху) до 100 (снизу). На уровне 0 имеется буква К (кровь), а на середине пипетки, около метки 50 — буква Р (реактив).

В капилляр Панченкова набирают 5% раствор лимоннокислого натрия до метки 50 (буква Р) и выдувают на часовое стекло. Из укола пальца, держа капилляр горизонтально, набирают кровь до метки 0 (Буква К). Затем выдувают кровь на часовое стекло с лимоннокислым натрием, после чего вторично набирают кровь до метки 0 и выпускают дополнительно к первой порции.

Следовательно, на часовом стеклышке имеется соотношение цитрата и крови, равное 1:4 , т. е. четыре объема крови в один объем реактива. Перемешивают кровь концом капилляра, набирают ее до метки 0 и ставят в аппарат Панченкова строго вертикально. Через час отмечают число миллиметров столбика плазмы.

В норме СОЭ равна для мужчин 4-10 мм, для женщин 4-15 мм в час.

Определение содержания гемоглобина

2. Пипетка от гемометра Сали.

7. Игла Франка или скарификатор.

Для количественного определения гемоглобина пользуются обычно колориметрическим способом. Принцип определения заключается в превращении гемоглобина крови в солянокислый гематин и сравнении цвета полученного с имеющимся в приборе стандартом. Прибором для определения служит гемометр Сали. Он состоит из двух запаянных

пробирок со стандартной цветной жидкостью 1% раствор солянокислого гематина в глицерине), содержащей 16,67 г% гемоглобина (16,67 г на 100 мл крови). Между ними расположена градуированная пробирка, имеющая две шкалы. Одна — с делениями от 0 до 23 служит для определения гемоглобина в граммах на 100 мл крови, т. е. в грамм процентах; другая шкала с делениями от 0 до 140 показывает единицы гемоглобина (процент гемоглобина).

В градуированную пробирку, находящуюся в среднем прорезе, наливают до начала шкалы 0,1N раствор соляной кислоты. Затем из места укола на мякоти пальца пипеткой Сали набирают кровь до метки 0,02 мл (20 мм3), насасывая ее ртом через надетую на верхний конец пипетки резиновую трубочку со стеклянным мундштуком. Кончик пипетки обтирают от крови и опускают в пробирку с соляной кислотой, осторожно выдувая содержимое, чтобы не образовались пузырьки воздуха. Ударяя пальцем по нижней части пробирки, тщательно размешивают кровь и оставляют ее на 5 мин. для образования солянокислого гематина. За это время набирают кровь для остальной части анализа. По истечении этого времени приливают в пробирку по каплям дистиллированную воду, размешивая стеклянной палочкой до тех пор, пока цвет раствора исследуемой крови полностью сравняется с цветом стандартной жидкости. Отмечают, на каком делении находится в градуированной пробирке нижний мениск раствора крови, показывающий содержание гемоглобина в г% или единицах (процентах).

В норме содержание гемоглобина в грамм-процентах у мужчин колеблется от 13,3 до 18 г%, у женщин — от 11,7 до 15,8 г% (в среднем 13,7); в единицах (процентах) у мужчин — от 80 до 108 ед., у женщин — от 70 до 95 ед.

Определение количества эритроцитов и лейкоцитов

1. смесители (меланжеры) или пробирки для подсчета эритроцитов и лейкоцитов.

2. 3% — раствор NaCl (для разведения эритроцитов) или жидкость Гайема.

3. 3% раствор уксусной кислоты.

Смесители представляют собой капиллярную пипетку с расширением- ампулой, содержащей бусинку, способствующую смешению крови с разводящей жидкостью. Смесители, предназначенные для подсчета эритроцитов, обладают капилляром более тонкого калибра и более объемистой ампулой на них нанесены метки одна — 0,5 другая — перед входом в ампулу — 1.0, третья — у выхода из ампулы — 101.

При набирании крови до метки 0,5 она окажется разведенной в 200 раз, при набирании до 1,0 — в 100 раз. Для разведения эритроцитов применяют 3% раствор поваренной соли или жидкость Гайема, в которой лучше сохраняется форма эритроцитов. Смеситель для лейкоцитов имеет более широкий просвет капилляра и меньшую по величине ампулу. Нанесены три метки: 0,5 , 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10, либо в 20 раз (чаще разводят в 20 Раз). Для разведения лейкоцитов используют 3 — 50% раствор уксусной кислоты. Уксусная кислота растворяет эритроциты, что позволяет вести подсчет только лейкоцитов.

Для подсчета форменных элементов наиболее часто применяется камера типа Бюркера с выгравированной на ней сеткой Горяева. Счетная камера состоит из толстого предметного стекла с особым углублением. На дне углубления счетной камеры выгравирована сетка, в клетках которой и подсчитываются форменные элементы. По краям углубления имеются возвышения, куда накладывается покровное стекло. Между нижней поверхностью этого стекла и дном углубления образуется замкнутое пространство, которое и представляет собой счетную камеру. Глубина камеры соответствует 0,1 мм. Счетная камера типа Бюркера разделена пополам глубокой канавкой и имеет на каждой половине сетку Горяева, что позволяет сразу считать 2 капли, не заполняя вновь камеры. Сетка Горяева имеет 225 больших квадратов (15Х15), 25 из которых разделены на малые, по 16 в каждом; имеются также пустые квадраты, собранные в группы по 4 квадрата. Всего в сетке 100 больших пустых квадратов, собранных в 25 групп (5X5). Каждая сторона маленького квадратика равна 1/20 мм, а так как высота камеры составляет 0,10 мм, то объем равен 1/4000 ммЗ.

Для подсчета эритроцитов берут смеситель для эритроцитов, надевают резиновую трубочку, легким насасыванием набирают кровь из укола до метки 0,5. Избыток крови удаляют фильтровальной бумагой, после чего кончик смесителя погружают в приготовленный заранее флакон с 3% раствором поваренной соли или раствором Гайема и насасывают раствор, заполняя всю ампулу до метки 101. Тотчас снимают резиновую трубку, зажимают смеситель по длине между большим и указательным или средним пальцем и встряхивают в течение 3 минут. После этого заполняют счетную камеру, сливают

1-2 капли и выпускают последующую каплю на сетку.

Для подсчета лейкоцитов кровь из места укола набирают до метки 0,5, затем разводят 3% раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 минут, после чего сливают

1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками

для подсчета эритроцитов, наливают 4 мл 3% раствора поваренной соли или жидкости Гайема и в нее выпускают 0,02 мл. крови,

отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Для подсчета белых кровяных элементов в пробирку наливают 0,4 мл 3 — 5% раствора

уксусной кислоты и 0,02 мл крови. Энергично встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку из гемометра Сали и,

набрав содержимое, заполняют счетную камеру.

Хорошо вымытое и вытертое шлифованное покровное стекло накладывают на выступающие боковые края. Мякотью больших пальцев покровное стекло притирают, двигая вверх и вниз, все время плотно прижимая, пока не появятся, так называемые, Ньютоновы кольца. Перед заполнением камеры вновь энергично встряхивают смесители. выпускают 2 капли на фильтровальную бумагу, а третьей заполняют щелку между камерой и покровным стеклом. Жидкость по капиллярности засасывается между ними и заполняет пространство над сеткой. Жидкость при заполнении камеры не должна затекать в желобки, если это стучится, то ее удаляют фильтровальной бумагой.

Подсчет эритроцитов. Подсчет производят спустя 1-2 минуты (когда эритроциты осядут на дно камеры), пользуясь объективом 40Х и окуляром 7X, либо объективом 8Х и окуляром 15Х.

Чтобы не сбиться со счета, придерживаются определенной

последовательности счета: передвигая из квадрата в квадрат по

горизонтали один ряд слева направо, следующий — справа налево. Считают, помимо находящихся внутри квадрата, все эритроциты, лежащие на двух линиях, например, на левой и верхней, и пропускают все лежащие справа и снизу. Считать эритроциты надо в 5 больших квадратах, т. е. в 80 маленьких.

Чтобы избежать неточности, вследствие не вполне равномерного распределения крови в камере, выбирают для подсчета не 5 рядом лежащих квадратов, а продвигаются по всей сетке.

Количество эритроцитов в 1 ммЗ (искомое) вычисляют следующим образом: единицей счета всегда, при всяком подсчете, в любой сетке служит малый квадрат. Объем его, как было указано, равен 1/4000 мм3. Сосчитав эритроциты в 5 больших квадратах (80 малых квадратов), делят это количество на 80 и умножают на 200 (степень разведения крови) и на 4000 (чтобы получить количество

клеток во всем кубическом миллиметре);практически, следовательно, полученное число умножают на 10000 (прибавляют четыре нуля).

Пример: В 80 маленьких квадратах подсчитано 480 эритроцитов. Следовательно, количество эритроцитов в 1 ммЗ крови равно:

Подсчет лейкоцитов. Для получения достаточно точного результата при подсчете лейкоцитов необходимо сосчитать не менее 100 больших квадратов (=1600 малых). Количество лейкоцитов в 1 мм3 получается следующим образом: число, сосчитанное в3100 больших квадратах, делят на 1600 (приводят к 1 малому квадрату) и умножают на 20 (степень разведения) и на 4000; практически, сокращая постоянные цифры формулы, количество сосчитанных лейкоцитов (при разведении в 20 раз) умножают на 50.

Пример: в 100 больших квадратах сосчитано 120 лейкоцитов.

Следовательно, количество лейкоцитов в 1 ммЗ равно

Нормальное количество эритроцитов в 1 ммЗ от 4500000 до 5000000. В норме среднее количество лейкоцитов в 1 мм3 от 5000 до 9000 (крайние границы 4000 — 9000).

Вычисление цветового показателя:

Зная число эритроцитов в крови и содержание в ней гемоглобина, можно высчитать в какой мере насыщен каждый эритроцит. Цветовой показатель соответствует максимальному содержанию гемоглобина в одном нормальном эритроците, величина его условно принимается за единицу.

Для вычисления цветового показателя пользуются следующей формулой:

найденное количество Нв найденное число эритроцит.

нормальное количество Нв нормальное число эритроцит.

Практически определение цветового показателя производят путем деления процента (единиц) гемоглобина на удвоенные две первые цифры числа эритроцитов. Если же число эритроцитов меньше 1000000, то процент Нв делится на удвоенную первую цифру числа эритроцитов.

Мазок крови делают обычно вслед за наполнением обоих смесителей. Вытирают палец и пользуются свежевыступившей каплей крови. Кровь берут на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем шлифованным предметным стеклом,

или толстым покровным стеклом, которое ставят на первое предметное стекло под углом 45′ в непосредственной близости от капли крови, чтобы она растекалась тонким слоем по ширине шлифованного стекла, делают на нем мазок. Хорошо сделанный мазок желтоватого цвета, просвечивает. Вслед за этим мазок фиксируют.

Фиксация мазка делается для того, чтобы уплотнить протоплазму форменных элементов крови и сделать мазок более устойчивым. Высохший на воздухе мазок погружается для фиксации в банку с метиловым спиртом на 1 — 3 мин., либо в смесь Никифорова, состоящую из равных частей этилового спирта и эфира, на 10-20 минут. По окончании фиксации мазки вынимают пинцетом и ставят в вертикальном положении на фильтровальную бумагу для высушивания.

0крашивание мазка производится, как правило, при помощи смеси нескольких красок. Наиболее широко применяется окраска мазка по Романовскому — Гимзе. Перед употреблением краску разводят дистиллированной водой из расчета 1 — 2 капли на 1 мл воды. Мазки укладывают на мостики из стеклянных палочек, опирающихся на края кюветы, и заливают красителем в максимальном количестве, которое может удержаться на стекле. Продолжительность окраски 30 минут. После окраски краситель смывают струей воды, а мазки ставят вертикально на фильтровальную бумагу для просушки.

1. Предметные стекла (обезжиренные).

2. 1% раствор бриллианткрезилблау (спиртовой).

3. Шлифовальное предметное стекло.

На обезжиренное абсолютно чистое предметное стекло наносят стеклянной палочкой каплю 1% алкогольного раствора краски бриллианткрезилблау. Шлифовальным предметным стеклом

эту каплю размазывают так же, как при приготовлении обычного

мазка крови. После подсыхания красителя на него наносят каплю

крови и делают тонкий мазок, который сразу помещают во влажную камеру (чашка Петри с вложенным в нее кусочком мокрой фильтровальной бумаги). Через 3-5 минут мазок вынимают, высушивают на воздухе и исследуют под микроскопом с иммерсией.

Под микроскопом эритроциты при этой окраске желтовато-зеленоватого цвета; в отдельных же эритроцитах замечается синяя

сеточка, иногда скудная и нежная, иногда обильная, зернистая —

Подсчет ретикулоцитов производится так:

Подсчитывают в поле зрения 1000 эритроцитов и отмечают сколько среди них ретикулоцитов. Найденное количество делят на 10. Нормальное содержание ретикулоцитов в крови 0,2 — 1,0%.

Подсчет лейкоцитарной формулы:

Лейкоцитарной формулой называют процентное соотношение

отдельных форм лейкоцитов крови. Для более точного ее вычисления необходимо просмотреть не менее 200 лейкоцитов. Так как различные виды лейкоцитов распределяются по мазку неравномерно,

необходимо соблюдать следующие правила: проводить подсчет по

верхнему и нижнему краю мазка, передвигая мазок по зигзагообразной линии. Считают три поля по самому краю в горизонтальном направлении, затем — три поля, направляясь к середине мазка, и т. и. Следовательно, в каждом из четырех участков насчитывают 50 клеток, а всего — 200. Для подсчета лейкоцитарной формулы используют специальный клавишный счетчик, на каждом клавише которого отмечается начальная 6yква названия лейкоцитов. Результаты подсчета лейкоцитарной формулы записываются в виде лейкограммы, имеющей в норме примерно следующий вид:

источник